[发明专利]利用稳定同位素比值判定中药白头翁产地的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药白头翁产地溯源技术领域；具体涉及一种利用稳定同位素比值判定中药白头翁产地的方法。

背景技术

白头翁是常见的中药材品种，药用价值高，具有清热解毒、凉血、明目、止痢等功效，根状茎药用，主治热毒痢疾，鼻衄，血痔，带下，阴痒，痈疮，瘰疬。分布于辽宁、河北、吉林、河南、安徽、甘肃等地，古以安徽产者为地道药材。不同产地的药材因自然条件、生态环境不同，质量有所差异，地道药材较其他地区所产者品质佳、疗效好。现在市场上品种质量真伪优劣不一，因此有效鉴定白头翁产地并控制原料药材质量，对规范中药市场非常重要。白头翁产地的传统检测方法多采用主观和经验方法，通过观察外形、颜色、植物形态、横断面形态和味道等性状来鉴别区分，效果很差；方艳夕等通过HPLC方法检测了不同产地白头翁中白头翁皂苷B4的含量，并建立了不同产地白头翁的HPLC指纹图谱，用于白头翁药材的鉴别，另外的一些检测鉴定白头翁的技术还有TLC、UV等。张振华曾报道用TLC、UV和HPLC的方法检测鉴定白头翁的产地。然而这些方法样品前处理复杂，测试步骤较多，耗时较长。因此，开发一种简易可行，能够有效进行白头翁产地溯源的技术方法对于维护消费者利益，促进我国中药行业健康发展，具有十分重要的意义。

稳定同位素质谱技术，过去多应用于地质领域，近年来在生态，农业，食品等领域有应用，然而，中药是我国所特有的，以前人们对中药的研究大都是对其传统方法的继承和改善，而中药的现代技术研究却是刚刚起步。故稳定同位素质谱技术也就很少应用于中药产地的鉴定；而且中药的产地来源比较复杂，一种中药材往往会有几个甚至几十个来源产地，而产地不同，其某些有效成分的含量也有所差别。鉴于中药产地的鉴定本身具有特殊性，所以目前尚无利用稳定同位素质谱技术鉴定白头翁产地的具体方法。

发明内容

本发明目的在于针对白头翁产地溯源方面存在的技术难题，提供一种利用稳定同位素比值判定中药白头翁产地的方法，从而解决我国中药材市场监管存在的技术难题，规范市场行为，保护消费者利益，促进中药材行业健康有序发展。

植物组织中的δ¹³C都普遍小于大气CO₂中的δ¹³C，表明CO₂在通过光合作用形成植物组织的过程中，会产生碳同位素分馏，而这种分馏的大小与植物的光合作用类型、遗传特性、生理特点、生长环境等因素密切相关，利用碳同位素技术可以区分C3、C4和CAM光合途径植物。植物组织中的δ¹⁵N受气候、环境、土壤等因素影响而发生自然分馏效应，导致不同产地的植物体内的同位素自然丰度产生差异。所以，植物体的同位素丰度在一定程度上能够反映植物的产地特征信息。本发明开拓性的发现白头翁的特征体现在N％、C％、δC¹³和δN¹⁵的结合，从而利用元素分析稳定同位素质谱联用仪检测白头翁的氮、碳百分含量，碳、氮稳定同位素δ¹³C、δ¹⁵N实现准确地区分不同产地的白头翁。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明涉及一种利用稳定同位素比值判定中药白头翁产地的方法，所述方法包括采用元素分析-稳定同位素质谱联用技术测定白头翁样品中N％、C％、δ¹⁵N和δ¹³C值。

优选地，所述方法包括对已知真实产地和未知产地白头翁样品的N％、C％、δ¹⁵N和δ¹³C值进行比较，通过统计软件进行Fisher判别分析对二者的N％、C％、δ¹⁵N和δ¹³C值四个变量进行显著性差异分析来判断未知产地样品与已知真实样品是否来自同一产地。若不存在显著差异，则表明未知产地样品与已知真实样品来自同一产地，反之则表明未知产地样品与已知真实产地样品来自不同的产地。

优选地，所述方法包括如下步骤：

步骤一、通过测定不同已知产地来源的白头翁样品中N％、C％、δ¹⁵N和δ¹³C值，构建真实产地白头翁N％、C％、δ¹⁵N和δ¹³C数据库；

步骤二、测定未知产地白头翁样品的N％、C％、δ¹⁵N和δ¹³C值；

步骤三、利用统计软件(R软件)进行Fisher判别分析，判断未知产地白头翁样品的真实产地。