[发明专利]一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法有效
| 申请号: | 201310495140.6 | 申请日: | 2013-10-22 |
| 公开(公告)号: | CN103627761A | 公开(公告)日: | 2014-03-12 |
| 发明(设计)人: | 杨会成;李八方;郑斌;马华威 | 申请(专利权)人: | 浙江省海洋开发研究院 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
| 代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人: | 尉伟敏 |
| 地址: | 316100 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 制备 羟脯氨酸 胶原 蛋白 方法 | ||
1.一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)选取鮟鱇鱼皮清洗,剪碎成片状,然后放入稀碱液中磁力搅拌24~30 h,取出后水洗至中性;
(2)加入正丁醇溶液,搅拌20~28 h后取出,用水洗涤并沥干;
(3)将沥干的鱼皮捣碎,加入稀酸溶液,加热到55~90℃,经5~7 h搅拌抽提,过滤后得到胶原蛋白粗提液;
(4)在胶原蛋白粗提液中加入0.8~1mol/L的 NaCl溶液盐析20~24h,然后用蒸馏水透析2~3天,得到胶原蛋白沉淀物;
(5)将胶原蛋白沉淀物溶于所述稀酸溶液中,以胶原蛋白沉淀物和稀酸溶液总质量计,加入1%~2%的胃蛋白酶,酶解5~6 h;
(6)然后调pH到6.5~7.5,以胶原蛋白沉淀物和稀酸溶液总质量计,加入0.1%~0.2%的风味蛋白酶,酶解6~7h;
(7)得到的酶解液进行灭酶、过滤,在滤液中加入活性炭脱芳脱色,然后离心分离除去活性炭,清液冷冻干燥,制得富羟脯氨酸胶原蛋白肽。
2.根据权利要求1所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,步骤(5)中胶原蛋白沉淀物和稀酸溶液的料液比为1:10~1:25。
3.根据权利要求1或2所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,所述稀酸溶液为1%~4%的醋酸溶液或柠檬酸溶液。
4.根据权利要求1所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,将步骤(3)中的胶原蛋白粗提液放入绝缘袋,进行高压脉冲电场处理0.5~1h。
5.根据权利要求4所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,高压脉冲电场处理的脉冲时间为1s,脉冲频率为30~40Hz,电场强度为15~25kV/cm。
6.根据权利要求1所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,步骤(5)和步骤(6)的酶解过程中使用超声波辅助酶解。
7.根据权利要求6所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,超声波频率为25~40kHz,功率为100~400W。
8.根据权利要求1所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,胃蛋白酶的酶比活力为3000~3500U/g,胃蛋白酶酶解温度为34~37℃。
9.根据权利要求1所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,风味蛋白酶的酶比活力为40000~50000 U/g,风味蛋白酶酶解温度为40~55℃。
10.根据权利要求1所述的一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法,其特征在于,步骤(1)稀碱液为2.5%~5.5%的NaOH溶液。
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