[发明专利]利用蚕蛹制取降血脂肽的方法

说明书

技术领域

 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及利用蚕蛹制备降血脂肽的方法。

背景技术

HMG-CoA还原酶是体内催化 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)生成二羟甲基戊酸(MVA)的关键酶，这一步是体内合成胆固醇的限速步骤，也是目前最主要的高血脂症临床药物的靶点。HMG-CoA 还原酶抑制剂是降血脂功效成分和药物筛选主要手段之一。目前，市场上使用的降脂药物大都为化学合成的他汀类药物，虽然其对改善由高血脂引起的心脑血管疾病有很好的疗效，但长期使用会有带来一系列的不良反应和副作用。

从天然蛋白中提取具有营养性和生理活性的功能肽，并将这些功能肽应用到保健食品和强化营养食品中，不但能够全面利用食品及食品加工中的优质蛋白，而且能够有效的提高来源广泛的蛋白质原料的附加值，同时大大提升传统食品的科技含量。

食品蛋白质经酶解产生的降血脂肽具有食用安全性高、无副作用、疗效好的优点，近年来受到广泛关注。目前人们已经成功的从大豆、大米、土豆、荞麦、鳕鱼、大西洋鲑、鲢鱼、乳清蛋白中获得了HMG-CoA还原酶抑制肽。但上述研究分离方法成本高，规模化生产的成本也较高，并且原料多为人们的生活食物。九十年代后期，国内外关于蛋白酶解肽的研究主要围绕在蛋白质的水解度、分子量大小、游离氨基酸含量、生物酶重复利用以及对苦味的控制和去除等。

蚕蛹(Silkworm pupa)为蚕蛾科昆虫家蚕蛾(Bombyx moil L.)的蛹，既是一种高营养的美食，也是一种中药，具有和脾胃、祛风湿、长阳气之功效，自古以来就得到广泛应用。现代医学证明，蚕蛹具有降低血胆固醇、治疗冠状动脉供血不足等效果。2000年全国产茧45.5万吨，生丝约6万吨。2001年中国国家经贸委发布的《茧丝绸行业“十五”规划》中预计到2015年，蚕茧产量将超过60万吨，生丝年产量将达到8万吨以上。而实际上，2011年，蚕茧产量就达到了66.1万吨。通常缫制1吨生丝可得1.5吨干蚕蛹，蚕蛹产量非常可观。同时随着蚕丝业的进一步发展．蚕蛹的产量将会更大，因此开发利用蚕蛹资源具有重要的意义与广阔的前景。

目前国内对于利用食物蛋白制备降血脂肽报道较少，采用缫丝后经脱脂的干蚕蛹这一原料广泛、价格低廉的蛋白质源制备降血脂肽的技术未见面世。

200610052094.2的发明《利用蚕蛹制取降血压肽的方法》公开了了一种利用蚕蛹制取降血压肽的方法，其特征是包括以下步骤：将脱脂干蚕蛹粉或蚕蛹蛋白粉与水按照1：6～7的重量比混和后，先调节pH值为6.0～6.5，然后升温至50～55℃并保持此温度18～22分钟，再加入中性蛋白酶进行酶解反应；所述中性蛋白酶的重量是脱脂干蚕蛹粉或蚕蛹蛋白粉的0.9％～1.1％，酶解反应温度50℃～55℃，酶解反应时间120～200分钟；所述中性蛋白酶的酶活力1.5AU/g ；所述酶解反应时间到后，将酶解反应产物迅速升温至85℃并保持此温度10～15分钟，再迅速冷却至0～30℃以终止酶解反应；然后离心即得酶解液；采用活性炭对所述酶解液进行脱色处理，活性炭用量为酶解液总重的5~30%，温度55℃；再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将所述粗滤酶解液在0.1～0.2Mpa的工作压力和0～45℃的工作温度下，采用超滤膜进行超滤处理，得超滤酶解液，所述超滤膜截留分子量为30千道尔顿；再将所述超滤酶解液依次进行真空浓缩、冷冻干燥；得降血压肽。肽含量为92.12%，产品得率为6.3%，利用体外检测ACE抑制活性的CUSHMAN法，测得其IC₅₀为1.02mg/ml。

采用该方法能到的是降血压肽，其对降血脂的效果相对较差。

发明内容

   本发明要解决的技术问题是提供一种成本低、所得降血压肽效果好的利用蚕蛹制取降血脂肽的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种利用蚕蛹制取降血脂肽的方法，包括以下步骤：

1）、将脱脂干蚕蛹粉或蚕蛹蛋白粉与水按照1:10~11的重量比混合后，先调节pH值为6.8～7.2（较佳为7.0），然后于5~10min内升温至85~95℃（较佳为90℃）并保温8~12min（较佳为10min）后自然冷却至45℃～50℃；接着再加入木瓜蛋白酶进行酶解反应，所述木瓜蛋白酶的重量是脱脂干蚕蛹粉或蚕蛹蛋白粉重量的1.5~2.5%（较佳为2%），酶解反应温度为45℃～50℃，酶解反应时间为3~4h（较佳为3.5h）；