[发明专利]一种检测香蕉枯萎病病原菌的致病力的方法无效
| 申请号: | 201310443260.1 | 申请日: | 2013-09-25 |
| 公开(公告)号: | CN103497989A | 公开(公告)日: | 2014-01-08 |
| 发明(设计)人: | 黄俊生;毛超;杨腊英;梁昌聪;郭立佳;刘磊;王国芬 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;C12R1/77 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
| 地址: | 571101 海南省海口市*** | 国省代码: | 海南;66 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 香蕉 枯萎病 病原菌 致病 方法 | ||
1.一种检测待测香蕉枯萎病病原菌对待测香蕉品种的致病力的方法,依次包括如下步骤:
(1)将每株待测香蕉品种的组培苗置于45mL水培营养液中培养至根长达10厘米,期间每1-4天更换新的所述水培营养液;所述水培营养液的制备方法如下:取900-1000mg CaCO3、450-500mg KNO3、100-150mg KH2PO4、150-200mg MgSO4和10-20mg FeSO4,溶于纯净水并用纯净水定容至1L;
(2)完成所述步骤(1)后,接种5mL菌悬液,28℃自然光照条件下培养3小时;所述菌悬液为悬浮待测香蕉枯萎病病原菌的分生孢子得到的孢子浓度为1×105-1×107cfu/mL的菌悬液;
(3)完成所述步骤(2)后,用50mL新的所述水培营养液替换原有液体,28℃自然光照条件下培养20-25天,期间每1-4天更换新的所述水培营养液;
(4)完成所述步骤(3)后,切开球茎观察褐变情况,统计病情指数,根据病情指数判断检测待测香蕉枯萎病病原菌对待测香蕉品种的致病力。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述水培营养液的制备方法如下:取950mg CaCO3、475mg KNO3、125mg KH2PO4、175mg MgSO4和15mg FeSO4,溶于纯净水并用纯净水定容至1L。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述菌悬液为孢子浓度为1×106cfu/mL的菌悬液。
4.如权利要求1至3中任一所述的方法,其特征在于:所述菌悬液的制备方法如下:取香蕉枯萎病病原菌的分生孢子,用含100mg/mL硫酸链霉素的PDA液体培养基作为液相,得到菌悬液。
5.如权利要求1至4中任一所述的方法,其特征在于:所述香蕉枯萎病病原菌为尖孢镰刀菌古巴专化型。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于:所述香蕉枯萎病病原菌为尖孢镰刀菌古巴专化型1号生理小种或尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种。
7.如权利要求1至6中任一所述的方法,其特征在于:所述香蕉品种为巴西蕉或粉蕉。
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