[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征复合活疫苗用冻干保护剂

权利要求书

1.一种猪繁殖与呼吸综合征复合活疫苗用冻干保护剂，其特征在于该冻干保护剂每1000ml磷酸缓冲液中含有中药多糖30～100g、中药黄酮20～60g、维生素6～10g、法氏囊素2～16mg、明胶4～6g和蔗糖40～70g，所述的中药多糖和中药黄酮从以下中药组合物中提取得到：生地、怀牛膝、桑白皮、茯苓、芦根、淫羊藿、生甘草和问荆。

2.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征复合活疫苗用冻干保护剂，其特征在于该冻干保护剂每1000ml磷酸缓冲液中含有中药多糖50～80g、中药黄酮30～50g、维生素7～9g、法氏囊素4～12mg、明胶5～6g和蔗糖50～60g。

3.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征复合活疫苗用冻干保护剂，其特征在于所述的中药多糖和中药黄酮通过以下步骤制得：

a、按生地10～30份、怀牛膝20～40份、桑白皮10～20份，茯苓10～30份、芦根10～30份、淫羊藿10～30份、生甘草10～20份、问荆10～30份称取各中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

c、将b中上清进行醇沉，沉淀即为粗制中药多糖，上清即为粗制中药黄酮；

d、用灭菌纯化水洗涤c中粗制中药多糖，洗涤后用20倍量的42℃灭菌纯化水进行溶解，溶解后，按0.5%比例加入活性炭4℃吸附过夜，吸附后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

e、将d中上清经0.22um滤膜过滤除菌后，进行10倍浓缩，制得中药多糖浓缩液；

f、将e中中药多糖浓缩液进行真空冷冻干燥即得到中药多糖；

g、将c中粗制中药黄酮进行减压真空浓缩，浓缩物用次灭菌注射用水稀释清洗，再次进行减压真空浓缩，如此三次后，再经0.22um滤膜过滤除菌，然后经冷冻真空干燥即得到中药黄酮。

4.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征复合活疫苗用冻干保护剂，其特征在于所述的维生素含有维生素B1 15～35%、维生素C 40～70%和维生素E 10～30%。

5.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征复合活疫苗用冻干保护剂，其特征在于所述的法氏囊素通过以下步骤制得：取健康法氏囊组织，将法氏囊组织剔除筋膜和脂肪组织， pH7.2灭菌冷PBS洗净；按1：1比例加入pH 7.2灭菌冷PBS，在组织匀浆机中进行高速匀浆；匀浆液中加入2.5%的胰蛋白酶，反复冻融3次，12000rpm离心20min，弃沉淀；上清用1000da截留分子量的超滤膜进行超滤，膜下液经0.22um滤膜过滤除菌，滤过液即为法氏囊素粗提液；粗提液经冷冻真空干燥制得法氏囊素冻干粉。