[发明专利]一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子及其制备方法

权利要求书

1.一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子，它是将锰锌铁氧体Mn_1-xZn_xFe₂O₄表面包覆二氧化硅，再在二氧化硅包覆层表面接枝环氧基，通过环氧基开环直接共价偶联抗体的氨基端而成，其中0.1≤x≤0.9。

2.根据权利要求1所述的一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子，其特征是，所述锰锌铁氧体居里温度为48℃～90℃。

3.一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子的制备方法，其特征是，包括步骤如下：

（1）锰锌铁氧体的制备：将MnCl₂.4H₂O、ZnCl₂、FeCl₃.6H₂O按照Mn_1-xZn_xFe₂O₄，0.1≤x≤0.9的比例称取配成混合溶液，然后放入水浴中加热并搅拌，将NaOH溶液滴加到搅拌中的混合溶液中，加完后使水浴升温至70～80℃，保温1～2h，然后降温冷却至室温并静置，倒去上清液，洗涤、抽滤，固体放入干燥箱中干燥，将试样研磨、过筛，得到锰锌铁氧体粉体；

（2）用二氧化硅包覆磁性锰锌铁氧体：将锰锌铁氧体与适量蒸馏水和无水乙醇制成混合液，超声震荡使其分散均匀，置于60～70℃水浴中，并加入少量氨水调pH=8～10，然后将硅酸四乙酯加入其中，持续搅拌4～6h，冷却降温，进行抽滤、洗涤、干燥得到表面包覆有SiO₂的锰锌铁氧体粉末；

（3）磁性锰锌铁氧体纳米粒子表面的二氧化硅接枝环氧基：先用无水乙醇和去离子水交替清洗锰锌铁氧体纳米粒子粉体，并在氮气中干燥，然后置于等离子清洗器中处理使二氧化硅表面生成一层活性的羟基，将等离子体处理好的二氧化硅包覆的锰锌铁氧体纳米粒子粉体迅速加入到3-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷的乙醇溶液中，并置于37±2℃气浴恒温振荡器反应24～48h，反应完成后用无水乙醇清洗，并在37℃氮气中干燥，得到表面环氧基化的磁性锰锌铁氧体纳米粒子粉末；

（4）环氧基开环共价偶联抗体氨基端：将表面环氧基化的磁性锰锌铁氧体纳米粒子粉末加入到相应的抗各种肿瘤细胞和肿瘤干细胞靶标的抗体稀释溶液中，置于4±2℃放置12～24h。

4.根据权利要求3所述的一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子的制备方法，其特征是：步骤（1）所述的MnCl₂.4H₂O、ZnCl₂、FeCl₃.6H₂O、NaOH的用量比例按摩尔比1-x:x:2:8，0.1≤x≤0.9;氢氧化钠溶液的浓度1mol/L;氯化盐混合溶液中氯化盐总浓度为1mol/L。

5.根据权利要求3所述的一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子的制备方法，其特征是：步骤（2）中无水乙醇和蒸馏水组成醇水体系，醇水体系中的乙醇、水体积比为50∶1；锰锌铁氧体的用量为每毫升醇水体系中含有0.3～0.5mg；硅酸四乙酯为每升醇水体系中加正硅酸乙酯0.026～0.0432mol。

6.根据权利要求3所述的一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子的制备方法，其特征是：步骤（3）中二氧化硅包覆的锰锌铁氧体纳米粒子的用量为每毫升3-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷的乙醇溶液用0.3～0.5mg；3-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷的乙醇溶液体积浓度为5～10%。

7.根据权利要求3所述的一种共价偶联抗体的水溶性自动控温铁氧体纳米粒子的制备方法，其特征是，步骤（4）所述的抗体稀释溶液浓度为5～15μg/mL；表面环氧基化的磁性锰锌铁氧体纳米粒子粉末的用量为每毫升抗体稀释溶液中含有0.3～0.5mg。