[发明专利]一种靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体，其特征在于，包括相偶联的针对病毒核心蛋白的抗体和蛋白转导域，两者偶联后构成穿膜抗体。

2.如权利要求1所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体，其特征在于，所述的针对病毒核心蛋白的抗体为单克隆抗体，所述的蛋白转导域为TAT、ant、HSV VP22、PDX1、Pep-1或Transportan10的穿膜肽；

所述的针对病毒核心蛋白的抗体与蛋白转导域通过EDC偶联。

3.如权利要求1所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体，其特征在于，所述的针对病毒核心蛋白的抗体为针对HIV、HCV、HCMV、HPV、EB或HSV病毒的抗体，所述的蛋白转导域为SEQ.ID.NO.1所示的穿膜肽。

4.如权利要求1所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体，其特征在于，所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体抑制细胞病毒复制，并抑制细胞内、外病毒的表达。

5.如权利要求4所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体，其特征在于，所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体为HBcMAb-TAT PTD，能够抑制细胞内、外HBsAg、HBeAg及细胞内HBcAg的表达，且存在剂量依赖关系。

6.一种靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

分别将针对病毒核心蛋白的抗体、蛋白转导域溶解后，加入到EDC溶液中，室温下充分反应；

反应完成后加入饱和硫酸铵进行沉淀，4℃放置过夜，离心去上清，PBS缓冲液溶解沉淀；将溶解产物放置于透析袋中，加入PBS缓冲液透析，3～4h更换一次透析液；更换3～4次，直至透析完全；将透析的产物全部收回，得到靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体。

7.如权利要求6所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体的构建方法，其特征在于，所述的针对病毒核心蛋白的抗体为HBcMAb，蛋白转导域为TAT。

8.基于权利要求6或7所制备的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体的转染方法，其特征在于，包括以下操作：

靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体与宿主细胞共孵育，然后加入含10%FBS和1%双抗的DMEM高糖培养基，37℃，5%CO₂培养箱中培养2h；用抗TAT-FITC荧光抗体的免疫荧光法检测穿膜抗体穿膜效应，筛选有细胞内有荧光的细胞作为转染成功的细胞。

9.权利要求1所述的靶向病毒核心蛋白的穿膜抗体在制备抗病毒感染的药物中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的药物为抑制病毒在细胞内外增殖和病毒DNA复制的药物。