[发明专利]一种抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质提取的制备方法

权利要求书

1. 一种抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质提取的制备方法，其特征是，所述樟芝菌丝体发酵全液活性物质由下述方法制得：

 加热：取经液体发酵的樟芝发酵全液或菌丝体或澄清液放于容器内，调整其pH值为8～12，置60～120℃下加热100～240分钟；

 过滤：之后冷却、以180～200目的筛网过滤樟芝发酵全液或菌丝体或澄清液，收集滤液，滤渣以其4～8倍体积的蒸馏水稀释，重复上述操作1～2遍，再收集滤液；

减压浓缩：离心完毕后弃去滤渣，合并收集的滤液，在温度50～70℃，压力0.2～0.6Kg/cm²，真空度为0.02～0.06Mpa的条件下进行减压浓缩，使滤液浓缩至原有体积的1/10～1/20；

醇析：在浓缩滤液中，加入量为其体积4～8倍的醇溶液并不断搅拌，搅拌速度为60r/min，10～20分钟后，静置24～48小时进行醇析；

离心分离：醇析后弃上清液，沉淀物移入离心管中，以转速为3000～5000r/min离心15～30min，离心后弃去上清液，收集离心沉淀物；

收集物干燥：将上述收集的离心沉淀物，在50～70℃温度条件下干燥4～48小时； 

(7)收集物粉碎：取上述烘干的收集物，进行粉碎，经200目筛网过筛后，即为樟芝抗禽流感病毒活性物质提取物。

2.如权利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质提取的制备方法，其特征在于所述樟芝发酵全液经分离获得樟芝发酵菌丝体和樟芝发酵澄清液。

3.如权利要求1或2所述的抗禽流感病毒的樟芝菌丝体发酵全液提取物的制备方法，其特征在于，所述樟芝发酵全液通过以下步骤获得：

（1）液体种子培养：采用500毫升三角瓶，每瓶装200毫升液体培养基，将10%的樟芝菌种以常规方法接种到装有液体培养基的三角烧瓶内，调节pH为3-8，培养温度为20-35℃，摇瓶转速为80-280r/min，培养7-15天，即可得到樟芝液体种子；

（2）发酵罐发酵：先将发酵罐中的培养基进行灭菌，灭菌压力为0.1～0.2公斤/平方厘米，灭菌时间为1-2小时；当樟芝液体种子pH值降至2.5-4时，将摇瓶中的樟芝种子接种到50L发酵罐的培养液中，调整pH为5-8，培养温度25-35℃，通气量0.5-1.1vvm，搅拌转速100-250r/min，培养7-30天，即可获得樟芝发酵全液。

4.如权利要求3所述的抗禽流感病毒的樟芝菌丝体发酵全液活性物质提取的制备方法，其特征在于，所述液体种子培养基或发酵培养基配方以克/100毫升计是：

马铃薯淀粉     1～3%               麦芽糖          1～5%

蛋白胨       0.2～0.6%             酵母膏        0.2～0.5%

硫酸镁       0.1～0.3%             磷酸二氢钾   0.05～0.1%。

5.如权利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质提取的制备方法，其特征是，所述樟芝菌株名为樟芝（Antrodia camphorata）。

6.如权利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质提取的制备方法，其特征在于步骤（4）中所述醇溶液为甲醇或乙醇水溶液，浓度为60-95%。

7.如权利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质提取的制备方法，其特征在于步骤（6）中所述收集物干燥使用真空干燥，真空度0.02-0.06Mpa，干燥时间12-36小时。

8.如权利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质提取的制备方法，其特征在于步骤（7）中所述收集物粉碎时采用200目的中药粉碎机对收集物进行粉碎过筛。

9.如权利要求1所述的抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质在制备抗禽流感病毒药物中的用途。

10.如权利要求9所述的抗禽流感病毒的樟芝发酵全液活性物质在制备抗禽流感病毒药物中的用途，其特征在于所述樟芝发酵全液活性物质在药物中的含量为10%-20%。