[发明专利]Isl1基因或蛋白在法洛氏四联症中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及先天性心脏病的诊断领域，具体地，涉及在产前筛查中预测或诊断法洛氏四联症。

背景技术

先天性心脏病（CHD）是最常见的先天性疾病，在新生儿中发病率高达1％。10%的新生儿死亡和20%的早期自发性流产与先天性心脏病直接相关。

目前，对于先天性心脏病的产前筛查往往在怀孕23-24周左右进行，严重的先心可进行人工流产，但此时进行流产对母体伤害较大；此外，目前依靠超声的产前先心筛查存在一定漏检率，这样出生的先心患儿为家庭和社会带来极大的负担。

心脏大血管的发育异常是最常见的先天性心脏病之一。大部分的心脏血管异常的先天性心脏病患者最终需要进行手术治疗，这占据了巨大的公共医疗资源，是沉重的社会和家庭负担。尽管有其显著的临床和社会的重要性，但是只有在不到13％的先天性心脏病患者中，能够确定相关遗传因素。对于绝大多数先天性心脏病，特别是复杂性先天性心脏病，其病因及相关机制仍有待进一步探索。这一现实制约了对先天性心脏病的早期诊断。

心脏大血管的形成涉及复杂的细胞和信号通路间的相互作用，其中BMP、FGF、Wnt、TGFT、Notch、Hedgehog、Endothelin和PDGF等信号通路在心脏大血管形成中起着重要作用。这些信号通路激活细胞内的转录因子，包括GATA因子(4-6）、NKX2.5、Tbx因子（1-3、5、18和20）、MEF2c和Hand1/2等。这些信号通路和转录因子相互作用，构成了复杂的心脏特异性的调控网络，共同调控心脏的形成（图1）。

研究发现，某些基因的早期缺失可导致心脏大血管的完全缺失，从而使胚胎在发育早期死亡。而干扰这一网络的平衡将导致心脏形成障碍，表现为一系列的心脏大血管形成异常，心腔分割和心肌发育异常，如房、室间隔缺损（ASD和VSD）。但目前而言，在心脏的中晚期的发育中，究竟哪一种关键基因的缺失或低表达不会导致胚胎死亡，但会导致心脏发育不全仍无法得知。

因此，本领域迫切需要开发一种能够早期筛查先天性心脏病的客观指标，尤其是与遗传因素相关或基因层面能够判断先心的方法。

发明内容

本发明提供了一种用于筛查先天性心脏病，尤其是法洛氏四联症的试剂盒。

本发明第一方面，提供了一种LIM同源结构域转录因子(LIM homeodomain transcription factor，Islet1，Isl1)基因或其蛋白的用途，用于制备预测或诊断法洛氏四联症(Tetralogy of Fallot，TOF)的试剂或试剂盒。

在另一优选例中，所述的Isl1基因包括Isl1基因组序列、cDNA序列或mRNA序列。

在另一优选例中，所述的Isl1基因或蛋白来自于哺乳动物，更佳地来源于啮齿动物(如小鼠、大鼠）或灵长类动物（如人）。

在另一优选例中，所述的Isl1基因或蛋白来源于人。

在另一优选例中，所述的Isl1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.:1所示，其编码的蛋白序列如SEQ ID NO.:2所示：

在另一优选例中，所述的试剂包括Isl1特异性引物、特异性抗体、探针和/或芯片。

在另一优选例中，所述的检测包括酶联免疫反应法(ELISA法)检测或时间分辨免疫荧光法(TRFIA法)检测。

在另一优选例中，所述的Isl1蛋白或其特异性抗体偶联有或带有可检测标记。

在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。

在另一优选例中，所述Isl1的特异性抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。

在另一优选例中，所述检测是测定羊水样品、组织样品、血液样品、血清样品或体液样品。

在另一优选例中，所述检测是测定羊水样品。

在另一优选例中，所述的试剂包括：

(a)检测Isl1的核酸芯片；

(b)抗Isl1蛋白的特异性抗体；和/或

(c)特异性扩增Isl1的基因组DNA、mRNA或cDNA的特异性引物。

本发明第二方面，提供了一种用于预测或诊断法洛氏四联症的试剂盒，所述的试剂盒含有检测Isl1的核酸芯片或特异性扩增Isl1核苷酸序列的特异性引物、以及说明书；其中所述的说明书包括以下内容：通过测定Isl1基因或蛋白的表达和/或活性来预测或诊断法洛氏四联症。

在另一优选例中，Isl1核苷酸序列包括基因组序列、mRNA序列或cDNA序列。