[发明专利]一种用于美容保养的成纤维细胞液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物化妆品及其制备方法，具体涉及一种用于美容保养的成纤维细胞液及其制备方法。

背景技术

随着人们生活水平的提高，人们对于美容保养越来越重视，市场上的美容保养品种类繁多。但是现有的精细化工护肤品大都含有铅、汞、酒精、防腐剂、激素、香料等对肌肤有损害的物质，在使用美容保养品的同时，也对皮肤造成了较大的伤害，甚至会产生的色斑、红血丝、过敏等问题，对人们的生活质量和身体健康造成了极大的威胁。

现有的美容保养品，大都通过化工方法制得，其产品中的有害物质残留较多，长期使用会对皮肤产生不利影响。而且现有产品大都不具有生物活性物质，不能够有效促进表皮细胞的新陈代谢，改善皮肤的光泽。而且，化工护肤品中含有的部分物质会对人体产生过敏反应，不适合全体人群使用。

成纤维细胞培养液，是最近几年新发展起来的生物技术领域，利用细胞培养液中的生物成分，能够起到较好的护肤效果，而且其生产方法脱离了化工生产工艺，具有较好的安全性和更好的生物活性，具有较好的推广和应用前景。

发明内容

本发明需要解决的技术问题就在于克服现有技术的缺陷，提供一种用于美容保养的成纤维细胞液及其制备方法，该成纤维细胞液具有促进表皮细胞新陈代谢，增强皮肤弹性，修复受伤表皮细胞，去除色斑等功效。

为解决上述问题，本发明采用技术方案为：

一种用于美容保养的成纤维细胞液及其制备方法，其特征在于，该成纤维细胞液含有细胞培养液、胶原蛋白、细胞生长因子、氨基酸和维生素；制备成纤维细胞液的方法采用成纤维细胞培养基培养脐带组织真皮细胞得到细胞培养液，再向细胞培养液的上清液中加入医用甘油和细胞因子制得成纤维细胞液。

本发明为了能够制具有美容保养功能的备成纤维细胞液，较佳的技术方案有，制备用于美容保养的成纤维细胞液的方法，该方法的步骤包括获取脐带组织真皮细胞、原代培养脐带组织真皮细胞、传代培养脐带组织真皮细胞、收集细胞培养液、加入甘油和细胞因子制得成纤维细胞液；用成纤维细胞培养基培养脐带组织真皮细胞获得细胞培养液，其中含有多种生物活性物质，能够起到较好的美容效果；在细胞液中加入甘油和细胞因子，细胞因子能够促进皮肤细胞的新陈代谢，提高细胞活力，能够提高干细胞液的美容功效。

本发明为了实现对于成纤维细胞液的生产制备，较佳的技术方案还有，制备用于美容保养的成纤维细胞液的方法，该方法的操作步骤为：

①获取脐带组织细胞：用含有青链霉素的磷酸盐缓冲液冲洗脐带组织3次，将脐带组织剪成小块后真皮面朝下平铺于平皿中，向平皿中加入中性蛋白酶Ⅱ过夜培养；过夜后分离表皮与真皮，将真皮剪成小块接种于含有成纤维细胞培养基的培养皿中得到脐带组织细胞；脐带组织的真皮细胞为成纤维细胞，分离出真皮细胞后能够进行后续培养以获得细胞培养液；

②原代培养脐带组织细胞：将得到的脐带组织真皮细胞进行原代培养，每三天更换一次成纤维细胞培养液；培养获得的脐带组织真皮细胞，使其正常生长后，进行传代培养以获得更多的成纤维细胞来制取细胞培养液；

③传代培养脐带组织真皮细胞：用酶解液消化原代培养的脐带组织真皮细胞，酶解完成后加入成纤维细胞培养基终止酶解，再用吸管吹打细胞，然后按照1:3的比例进行传代培养；为了获得较多的细胞培养液，将脐带组织真皮细胞进行传代培养；

④收集细胞培养液：将传代至4~6代的培养皿中的细胞上清液收集起来得到细胞培养液；细胞生长至4~6代时生长旺盛，产生较多的对皮肤有利的生物活性物质，传代次数过多会产生较多的对生物组织有害的细胞代谢产物，故选择传代至4~6代的细胞提取细胞培养液为好；

⑤加入甘油和细胞因子制得成纤维细胞液：向细胞培养液中加入医用甘油和细胞因子制得成纤维细胞液；为了制得能够使用的美容化妆品细胞液，向所得的干细胞液中在添加甘油及细胞因子，使得干细胞液具有更好的美容保养功能，其中的生物因子包括多种细胞生长因子、维生素和氨基酸等皮肤所需的物质，促进皮肤细胞的新陈代谢，使肌肤更加美白和富有弹性。

本发明为了高效获取脐带组织真皮细胞，较佳的技术方案还有，第一步中将真皮剪成0.5~1mm³的小块，以便于真皮细胞快速生长，避免内部细胞死亡；第一步中过夜培养的条件为4℃过夜培养。

本发明为了保证原代培养真皮细胞操作中使其快速大量生长，较佳的技术方案还有，第二步中原代培养脐带组织真皮细胞的条件为，向培养皿中加入0.5ml成纤维细胞培养基于37℃恒温培养，培养箱中二氧化碳气体的体积分数为5%。