[发明专利]绿色荧光蛋白放射免疫试剂盒及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.一种绿色荧光蛋白的放射免疫试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：放射性核素标记的绿色荧光蛋白、绿色荧光蛋白多克隆抗体、缓冲液A、缓冲液B、PR分离剂和绿色荧光蛋白标准品。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述放射性核素标记的标记物为¹²⁵I，标记方法为氯胺T法。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述缓冲液A为0.1M磷酸缓冲液pH7.2。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述缓冲液B为1%牛血清白蛋白，0.1%冷海鱼皮胶，0.05%叠氮钠，0.1M磷酸缓冲液pH7.2。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述PR分离剂为驴抗兔二抗，6%聚乙二醇，γ球蛋白，0.1M磷酸缓冲液pH7.4。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述驴抗兔二抗按1：1000稀释。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述标准品溶液为9个浓度梯度，具体为1pg/ml，2pg/ml，4pg/ml，8pg/ml，16pg/ml，32pg/ml，64pg/ml，128pg/ml，256pg/ml。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括反应管，所述反应管材料为聚苯乙烯、聚乙烯或聚丙乙烯，优选为聚苯乙烯。

9.权利要求1-8任一项所述试剂盒在检测绿色荧光蛋白中的应用。

10.一种应用权利要求1-8任一项所述试剂盒检测绿色荧光蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）样品前处理

对血液样本，4℃离心4000rpm，5min，分离血清；

对组织样本，采用组织蛋白提取液进行组织总蛋白提取；

（2）应用权利要求1-8任一项所述的试剂盒检测样品，测定沉淀放射性计数；

（3）绘制标准曲线，计算样品蛋白含量。