[发明专利]一种高纯度万古霉素的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将万古霉素脱色液在含有NH₄HCO₃流动相的层析介质中进行柱层析，所述层析介质为UniPMM50CAR，所述NH₄HCO₃流动相中NH₄HCO₃质量体积浓度为0.2-0.7%；在检测波长280nm，吸光度升至40时，开始分段收集层析液，用盐酸将层析液pH调至3.0-3.5，4℃条件下保存层析液，合并收集的层析液。

2.根据权利要求1所述的高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，所述流动相以流量为2.5倍柱体积/小时进行洗脱。

3.根据权利要求1所述的高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将万古霉素脱色液在含有NH₄HCO₃流动相的层析介质中进行柱层析，所述层析介质为UniPMM50CAR，所述NH₄HCO₃流动相中NH₄HCO₃质量体积浓度为0.2-0.7%；在检测波长280nm，吸光度升至40时，开始分段收集层析液，用盐酸将层析液pH调至3.0-3.5，4℃条件下保存；

S2：将步骤S1所得分段收集的层析液合并，纳滤浓缩，用氨水调pH至6-7，加入还原剂，将pH调至8-9，搅拌4-10h后，抽滤得万古霉素；所述还原剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、硫代甘油、半胱氨酸、抗败血酸、抗败血酸酯、氢醌、没食子酸丙酯、甘氨酸、苯丙氨酸中的一种或几种；

S3：冷冻干燥得万古霉素冻干粉。

4.根据权利要求3所述的高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中所述还原剂为亚硫酸氢钠，所述亚硫酸氢钠质量体积浓度为0.6-0.8%。

5.根据权利要求3所述的高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将万古霉素脱色液在含有NH₄HCO₃流动相的层析介质中进行柱层析，所述层析介质为UniPMM50CAR，所述NH₄HCO₃流动相中NH₄HCO₃质量体积浓度为0.2-0.7%；在检测波长280nm，吸光度升至40时，开始分段收集层析液，将层析液pH调至3.0-3.5，4℃条件下保存层析液；

S2：将步骤S1所得分段收集的层析液合并，纳滤浓缩，用氨水调pH至6-7，加入还原剂，将pH调至8-9，搅拌4-10h后，抽滤得万古霉素；

S3：将步骤S2得到的万古霉素溶于水，万古霉素水溶液在含有NH₄HCO₃流动相的层析介质中进行柱层析，所述层析介质为UniPMM50CAR，所述NH₄HCO₃流动相中NH₄HCO₃质量体积浓度为0.2-0.7%；检测波长280nm，吸光度升至40时，开始分段收集，将层析液pH调至3.0-3.5，4℃条件下保存层析液；

S4：将步骤S3得到的收集的层析液合并，纳滤浓缩，得万古霉素水溶液在大孔吸附树脂中进行柱层析，在检测波长280nm，吸光度升至40时，开始分段收集，将层析液pH调至3.0-3.5，4℃条件下保存层析液；

S5：将步骤S4分段收集液合并，纳滤浓缩，调pH至6-7，加入还原剂，将pH调至8-9，缓慢搅拌4-10h后，抽滤得万古霉素；

S6：冷冻干燥得万古霉素冻干粉。

6.根据权利要求5所述的高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中分段收集的层析液纳滤浓缩后，所得万古霉素水溶液的浓度为60mg/mL-65mg/mL。

7.根据权利要求5所述的高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中采用的大孔吸附树脂为HP20SS，流动相为质量体积浓度为1-3%的乙醇。

8.根据权利要求5所述的高纯度万古霉素的制备方法，其特征在于，所述步骤S2和步骤S5中所述还原剂为亚硫酸氢钠，所述亚硫酸氢钠质量体积浓度为0.6-0.8%。