[发明专利]用tdcD酶表达弱化和/或酶活性降低的细菌发酵生产L-色氨酸的方法有效
| 申请号: | 201310278996.8 | 申请日: | 2013-07-05 |
| 公开(公告)号: | CN103333927A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
| 发明(设计)人: | 马吉银;魏爱英;孟刚;贾慧萍;马风勇;李小刚 | 申请(专利权)人: | 宁夏伊品生物科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12P13/22 | 分类号: | C12P13/22;C12N15/09;C12N1/20;C12N15/11;C12R1/19 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 750100 宁夏回族自治区银川市*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | tdcd 表达 弱化 活性 降低 细菌 发酵 生产 色氨酸 方法 | ||
1.发酵生产L-色氨酸的方法,其包括:
(1)改造细菌染色体上的野生型的tdcD基因,使改造获得的细菌的tdcD酶的表达量和/或酶活性降低,优选消失,更优选彻底消失;和,
(2)用步骤(1)改造而得到的细菌发酵生产L-色氨酸。
2.提高L-色氨酸的发酵量的方法,其包括:
(1)改造细菌染色体上的野生型的tdcD基因,使改造获得的细菌的tdcD酶的表达量和/或酶活性降低,优选消失,更优选彻底消失;和,
(2)用步骤(1)改造而得到的细菌发酵产生L-色氨酸。
3.改造获得的细菌在发酵生产L-色氨酸中的应用,其中,所述改造获得是改造细菌染色体上的野生型的tdcD基因而获得,而且使改造获得的细菌的tdcD酶的表达量和/或酶活性降低,优选消失,更优选彻底消失。
4.改造获得的细菌在提高L-色氨酸的发酵量的应用,其中,所述改造获得是改造细菌染色体上的野生型的tdcD基因而获得,而且使改造获得的细菌的tdcD酶的表达量和/或酶活性降低,优选消失,更优选彻底消失。
5.改造细菌的方法,其包括改造所述细菌染色体上的野生型的tdcD基因,使改造获得的细菌的tdcD酶的表达量和/或酶活性降低,优选消失,更优选彻底消失。
6.权利要求1-5之任一所述的方法或应用,其中,所述野生型的tdcD基因的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。
7.权利要求1-6之任一所述的方法或应用,其中,所述改造细菌染色体上的野生型的tdcD基因是改造成不具有核苷酸序列如SEQ ID No:1所示的基因,优选改造成抗生素抗性基因,更优选是抗氯霉素抗性基因。
8.权利要求1-7之任一所述的方法或应用,其中,所述细菌是埃希氏菌属细菌,优选是大肠杆菌。
9.权利要求5所述的方法改造而得到的细菌。
10.引物,其多核苷酸选自,
5'GTGGGAGAGATCTCACTAAAAACTGGGGATAACGCCTTAAATGGCGAAGAAACGGTTTGAGCGATTGTGTAGGCTGGAG3',和
5'CATCCTGAACATCGTATACAAACTGTTTTAATCCGTAACTCAGGATGAGAAAAGAGTAACGGCTGACATGGGAATTAGC 3'。
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