[发明专利]抗小麦黄花叶病毒的簇毛麦4VS染色体的特异分子标记

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及抗小麦黄花叶病毒的簇毛麦4VS染色体的特异分子标记。

背景技术

小麦黄花叶病（wheat yellow mosaic，WYMV）是由小麦黄花叶病毒（wheat yellow mosaic bymovirus）引起的一种土传病毒病害，其传播介体禾谷多黏菌（Polymyxa graminis）的休眠孢子囊在土壤干燥条件下可存活数年以上，通过农事操作、病土、病根残体等传播，或通过带介体土壤混杂在种子里进行远距离传播。发生小麦黄花叶病的田块，一般可减产20-30%，严重时可达70%，甚至绝收（刘伟华等，2004；Liu等，2005a，2005b）。我国每年小麦黄花叶病发生面积多达1000万亩以上，且呈现逐年扩展趋势，发生流行的威胁正在逐步增加，对小麦生产造成了重大损失（陈剑平，2005；孙炳剑等，2011）。

选育和推广抗病品种是控制小麦黄花叶病最经济、有效的途径。我国已育成了仪宁小麦、宁丰小麦、宁麦9号、宁麦13、扬辐麦9311及扬辐麦4号等高抗新品种，有效控制了该病害的蔓延（何震天等，2009）。但目前育种工作中主要利用小麦2D和5A染色体长臂上的主效抗黄花叶病位点（Nishio等，2010；Zhu等，2012），小麦抗黄花叶病的遗传基础较为狭窄。因此，发掘和利用新的抗黄花叶病遗传资源，定位和克隆抗病新基因是小麦抗黄花叶病遗传改良工作中的一个迫切需求。

栽培品种遗传基础日趋狭窄已成为小麦育种取得突破性进展的主要瓶颈(李振声，2010)。小麦近缘种属蕴藏丰富的抗生物和非生物胁迫以及高产、优质因子等基因资源，通过远缘杂交将近缘物种中的优良基因导入普通小麦，是拓宽小麦遗传基础、推进小麦育种取得突破性进展的有效途径（吉万全等，2001；张增艳等，2004；王述民等，2011）。

簇毛麦（Haynaldia villosa,基因组VV）原产于地中海沿岸，是栽培小麦的二倍体近缘物种，兼抗白粉病、条锈病、全蚀病、眼斑病和黄花叶病等多种病害（Gradzielewska，2006）。南京农业大学细胞遗传研究所自上世纪70年代起开始开展将簇毛麦优异基因导入普通小麦的研究，利用远缘杂交和染色体工程手段育成了小麦-簇毛麦1V-7V整套异附加系、涉及4V和6V染色体的异代换系和抗白粉病的T6VS·6AL易位系。为了进一步研究簇毛麦所携的优异基因，首先对簇毛麦、小麦-簇毛麦双二倍体、小麦-簇毛麦4V二体异附加系、4V（4D）异代换系、T4VS·4DL纯合补偿性易位系进行了多年多点的小麦黄花叶病抗性鉴定，并开展了簇毛麦4VS染色体特异分子标记的开发和筛选等研究。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的上述缺陷，提供抗小麦黄花叶病毒的簇毛麦4VS染色体的特异分子标记。

本发明的另一目的在于提供所述抗小麦黄花叶病毒的簇毛麦4VS染色体的特异分子标记的应用。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

簇毛麦4VS染色体的特异性分子标记，选自标记CINAU66和标记CINAU295中的任意一种；标记CINAU66的引物序列为：CINAU66F：SEQ ID NO.1，CINAU66R：SEQ ID NO.2，用标记CINAU66的引物从含有簇毛麦4VS染色体的抗病植株中能扩增出约950bp的特异条带；标记CINAU295的引物序列为：CINAU295F：SEQ ID NO.3，CINAU295R：SEQ ID NO.4，用标记CINAU295的引物从含有簇毛麦4VS染色体的抗病植株中扩增出约380bp的特异条带。

本发明所述的簇毛麦4VS染色体的特异性分子标记引物，选自CINAU66F/CINAU66R或CINAU295F/CINAU295R中的任意一对，引物CINAU66F序列为：SEQ ID NO.1，引物CINAU66R序列为：SEQ ID NO.2，引物CINAU295F序列为：SEQ ID NO.3，引物CINAU295R序列为SEQ ID NO.4。

本发明所述的分子标记在鉴定含簇毛麦4VS染色体小麦中的应用。

本发明所述的分子标记在分子标记辅助选择育种中的应用。

本发明所述的分子标记引物在鉴定含簇毛麦4VS染色体小麦中的应用。

本发明所述的分子标记引物在分子标记辅助选择育种中的应用。

利用本发明所述的分子标记引物标记抗小麦黄花叶病毒的簇毛麦4VS染色体的方法，包括以下步骤：