[发明专利]与PYY类似物结合的脂质体及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及脂质体。具体涉及与PYY类似物结合的、具有优良的血中稳定性和治疗效果的脂质体，及其制备技术。 

背景技术：

多肽、蛋白类药物与传统药物相比，不仅具有用药剂量小、疗效好、毒副作用低等突出优点，而且还具有不同于传统药物的一些特性：1)蛋白质分子的化学结构决定其活性，影响活性的结构因素主要为氨基酸及其排序、末端基团、肽链和二硫键位置等。此外，药物的空间结构即二维、三维结构也同样影响生物活性。2)蛋白质药物体内外不稳定性。蛋白质药物在体内外环境可能经受多种复杂的化学降解和物理变化而失活，如凝聚、沉淀、消旋化、水解、脱酰氨基等。3)蛋白质药物半衰期短、清除率高、分子量大、易受体内酶和细菌以及体液的破坏、非注射给药生物利用度低，一般都仅为百分之几。因此，如何设计出安全、有效和稳定的转运多肽、蛋白类药物的新型给药系统是当今制剂工作者和制药业面临的一个重大难题。 

多肽、蛋白类药物脂质体的研究是当前一个十分活跃的领域。脂质体用做多肽、蛋白类药物载体具有众多优点和用途：(1)根据脂质体类似生物膜的结构，脂质体可以用来测定多肽、蛋白类药物通过膜的渗透性能及药物在膜和水相之间的分配性能等；(2)根据脂质体具有细胞亲和性，适合体内降解、无毒性和无免疫原性的特点，脂质体被广泛制药和化妆品中的多肽、蛋白类药物载体；(3)脂质体做为药物载体可控制药物的释放和具有器官靶向性，可用于药物的可控释放和体内的靶向给药；(4)利用脂质体可与细 胞融合的特性，脂质体还可用作将目的基因和其它多肽、蛋白类物质向细胞内传递的工具，介导转染作用。 

作为向特定部位输送大量药剂的手段，提出了将药剂封入脂质体，使抗体结合到脂质体表面的方法。特别是在癌的治疗领域，有许多关于其中封入了抗肿瘤药、与抗体结合的脂质体的有效性的报道(Konno等，Cancer Tes.，47，4471，1987；特开昭58-134032号公报。进而，作为对脂质体存在的问题，即封入物的漏出、脂质体的凝集以及在网状内皮器官中的捕获等的改善方法，提出了向脂质体上结合聚乙二醇的方法(特开平1-249717号公报、特开平2-149512号公报、Klibanovet，A.L等，FEBS Lett.，268，235，1990)。 

在特开平4-346918号公报中，公开了与蛋白质结合的含有药剂的脂质体，其特征在于具有蛋白质和包含聚乙二醇部分的化合物残基，所述蛋白质和化合物残基分别通过各自的硫羚基与内含药剂的脂质体表面的马来酸亚胺基结合.这种脂质体是使结合在杭体上的硫巯基和结合在含聚乙二醇部分的化合物上的硫巯基与脂质体表面的马来酸亚胺基反应来制备的，它的特征在于如通过历来的脂质体所观察到的那样，在肝脏、脾脏等网状内皮系统中的非特异性摄入得到抑制，实现了靶向性的化学疗法。 

PYY是最初从胰肠分离的36个残基肽酰胺，并位于胃肠道和胰腺的内分泌细胞中(Tatemoto等，Proc.Natl.Acad.Sci.79：2514，1982)。肽YY具有N-端和C-端酪氨酸酰胺；因此，这两个酪氨酸给予PYY其名字(Y表示肽命名中的氨基酸酪氨酸)。此外，PYY共享其最初从猪脑分离出来的同源肽神经肽Y(NPY)的多个中枢和外周调节作用(Tatemoto，Proc.Natl.Acad.Sci.79：5485，1982)。与PYY的细胞定位相反，NPY存在于粘膜下和肠肌层神经元中，其各自神经支配粘膜和平滑肌层(Ekblad等，Neuroscience20：169，1987)。认为PYY和NPY都能抑制肠运动性和血流(Laburthe，Trends Endocrinol.Metab.1：168，1990)，还认为它们在大鼠中减弱基础的(Cox等，Br.J.Pharmacol.101：247，1990)和促分泌素诱导的肠分泌(Lundberg等， Proc.Natl.Acad.Sci USA79：4471，1982)，以及刺激净吸收(MacFadyen等，Neuropeptides7：219，1986)。总之，这些观察表明进餐后PYY和NPY释放至循环中(Adrian等，Gastroenterology89：1070，1985；Balasubramaniam等，Neuropeptides14：209，1989)，因此在调节肠分泌和吸收中起着生理作用。