[发明专利]一种支持CHO高密度悬浮培养的无血清无蛋白培养基有效
| 申请号: | 201310106385.5 | 申请日: | 2013-03-29 |
| 公开(公告)号: | CN104073463B | 公开(公告)日: | 2019-01-01 |
| 发明(设计)人: | 胡辉;李军;翁志兵 | 申请(专利权)人: | 三生国健药业(上海)股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/02 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 201203 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 支持 cho 高密度 悬浮 培养 血清 蛋白 培养基 | ||
1.一种支持CHO高密度悬浮培养的无血清无蛋白培养基,其特征在于,培养基组分包括,氨基酸、微量元素及无机盐、维生素、碳水化合物和其他有机分子,其中含有类固醇激素,而不含有转铁蛋白和胰岛素,其中,培养基干粉中各组分和用量如下,
氨基酸的组分和用量,
L-精氨酸 arg 500 ~ 1000mg/l
L-天冬酰胺 asp 200 ~ 400mg/l
L-丙氨酸 ala 3 ~ 30mg/l
L-羟浦氨酸 HYPRO 50 ~ 150mg/L
L-半胱氨酸 CYS 80 ~ 120 mg/l
L-谷氨酸 GLU 250 ~ 350 mg/l
L-组氨酸 his 100 ~ 300mg/L
L-异亮氨酸 IIE 400 ~ 550 mg/l
L-甘氨酸 GLY 30 ~ 55 mg/l
L-天冬氨酸 ASN 80 ~ 160 mg/l
L-亮氨酸 leu 500 ~ 1000 mg/l
L-赖氨酸 lys 500 ~ 1000 mg/l
L-蛋氨酸 met 50 ~ 250 mg/l
L-苯丙氨酸 phe 200 ~ 400 mg/l
L-脯氨酸 pro 500 ~ 1000 mg/l
L-丝氨酸 SER 500 ~ 1000 mg/l
L-苏氨酸 thr 200 ~ 500 mg/l
L-色氨酸 trp 50 ~ 100 mg/l
L-酪氨酸 tyr 100 ~ 300 mg/l
L-缬氨酸 val 300 ~ 500 mg/l
微量元素及无机盐的组分和用量,
AlCl3·6H2O 0.5 ~ 2.5mg/L
AgNO3 0.02 ~ 0.045mg/L
CoCl2·6H2O 0.05 ~ 0.3mg/L
CuSO4·5H2O 0.002 ~ 0.004mg/L
KBr 0.0005 ~ 0.0008mg/L
FeSO4·7H2O 0.5 ~ 1.5mg/L
Na2SiO3 0.005 ~ 0.045mg/L
LiCl 0.0005 ~ 0.001mg/L
NiCl2·6H2O 0.02 ~ 0.25mg/L
SnCl2·2H2O 2.00 ~ 8.00mg/L
ZnSO4·7H2O 0.5 ~ 2.5mg/L
CaCl2 20~50mg/L
KCl 200 ~ 500mg/L
NaCl 4000 ~ 6000mg/L
柠檬酸铁 20 ~ 100mg/L
维生素的组分和用量,
氢化可的松 0.001 ~ 0.003 mg/L
维生素C 10 ~ 25mg/L ;
维生素B6 0.01 ~ 0.2mg/L
维生素B12 0.01 ~ 0.5mg/L
生物素 0.05 ~ 0.18mg/L
叶酸 0.02 ~ 8.00mg/L
核黄素B2 0.1 ~ 0.15mg/L
氯化胆碱 40 ~ 100 mg/L
烟酰胺B3 10 ~ 25mg/L
泛酸钙 2.0 ~ 8.5mg/L
碳水化合物和其他有机分子的组分和用量,
肌醇 700 ~ 1000mg/L
甲醇胺 1.0 ~ 10.0 mg/L
乙醇胺 10.0 ~ 30.0 mg/L
硫胺素(B1) 5.0 ~ 20.0 mg/L
还原型谷胱甘肽 0.5 ~ 2.5mg/L
腺嘌呤 5.5 ~ 8.5mg/L
鸟嘌呤 5.5 ~ 8.5mg/L
尿嘧啶 5.5 ~ 8.5mg/L
胸腺嘧啶 0.25 ~ 1.5mg/L
胞嘧啶 5.5 ~ 8.5mg/L
核糖 2.0 ~ 8.5mg/L
脱氧核糖 2.0 ~ 8.5mg/L
酚红 0.001 ~ 0.005mg/L
地塞米松 0.01~0.05mg/L
孕酮 2.0 ~ 8.5mg/L
亚油酸 0.05 ~ 0.50ul/L
亚麻酸 0.005 ~ 0.050ul/L
硬脂酸 0.005 ~ 0.050mg/L
棕榈油酸 0.05 ~ 0.50ul/L
油酸钠 0.005 ~ 0.050mg/L
豆蔻酸钠 0.005 ~ 0.050mg/L。
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