[发明专利]一种支持CHO高密度悬浮培养的无血清无蛋白培养基有效

专利信息
申请号: 201310106385.5 申请日: 2013-03-29
公开(公告)号: CN104073463B 公开(公告)日: 2019-01-01
发明(设计)人: 胡辉;李军;翁志兵 申请(专利权)人: 三生国健药业(上海)股份有限公司
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071;C12N5/02
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 201203 上海市浦*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 支持 cho 高密度 悬浮 培养 血清 蛋白 培养基
【权利要求书】:

1.一种支持CHO高密度悬浮培养的无血清无蛋白培养基,其特征在于,培养基组分包括,氨基酸、微量元素及无机盐、维生素、碳水化合物和其他有机分子,其中含有类固醇激素,而不含有转铁蛋白和胰岛素,其中,培养基干粉中各组分和用量如下,

氨基酸的组分和用量,

L-精氨酸 arg 500 ~ 1000mg/l

L-天冬酰胺 asp 200 ~ 400mg/l

L-丙氨酸 ala 3 ~ 30mg/l

L-羟浦氨酸 HYPRO 50 ~ 150mg/L

L-半胱氨酸 CYS 80 ~ 120 mg/l

L-谷氨酸 GLU 250 ~ 350 mg/l

L-组氨酸 his 100 ~ 300mg/L

L-异亮氨酸 IIE 400 ~ 550 mg/l

L-甘氨酸 GLY 30 ~ 55 mg/l

L-天冬氨酸 ASN 80 ~ 160 mg/l

L-亮氨酸 leu 500 ~ 1000 mg/l

L-赖氨酸 lys 500 ~ 1000 mg/l

L-蛋氨酸 met 50 ~ 250 mg/l

L-苯丙氨酸 phe 200 ~ 400 mg/l

L-脯氨酸 pro 500 ~ 1000 mg/l

L-丝氨酸 SER 500 ~ 1000 mg/l

L-苏氨酸 thr 200 ~ 500 mg/l

L-色氨酸 trp 50 ~ 100 mg/l

L-酪氨酸 tyr 100 ~ 300 mg/l

L-缬氨酸 val 300 ~ 500 mg/l

微量元素及无机盐的组分和用量,

AlCl3·6H2O 0.5 ~ 2.5mg/L

AgNO3 0.02 ~ 0.045mg/L

CoCl2·6H2O 0.05 ~ 0.3mg/L

CuSO4·5H2O 0.002 ~ 0.004mg/L

KBr 0.0005 ~ 0.0008mg/L

FeSO4·7H2O 0.5 ~ 1.5mg/L

Na2SiO3 0.005 ~ 0.045mg/L

LiCl 0.0005 ~ 0.001mg/L

NiCl2·6H2O 0.02 ~ 0.25mg/L

SnCl2·2H2O 2.00 ~ 8.00mg/L

ZnSO4·7H2O 0.5 ~ 2.5mg/L

CaCl2 20~50mg/L

KCl 200 ~ 500mg/L

NaCl 4000 ~ 6000mg/L

柠檬酸铁 20 ~ 100mg/L

维生素的组分和用量,

氢化可的松 0.001 ~ 0.003 mg/L

维生素C 10 ~ 25mg/L ;

维生素B6 0.01 ~ 0.2mg/L

维生素B12 0.01 ~ 0.5mg/L

生物素 0.05 ~ 0.18mg/L

叶酸 0.02 ~ 8.00mg/L

核黄素B2 0.1 ~ 0.15mg/L

氯化胆碱 40 ~ 100 mg/L

烟酰胺B3 10 ~ 25mg/L

泛酸钙 2.0 ~ 8.5mg/L

碳水化合物和其他有机分子的组分和用量,

肌醇 700 ~ 1000mg/L

甲醇胺 1.0 ~ 10.0 mg/L

乙醇胺 10.0 ~ 30.0 mg/L

硫胺素(B1) 5.0 ~ 20.0 mg/L

还原型谷胱甘肽 0.5 ~ 2.5mg/L

腺嘌呤 5.5 ~ 8.5mg/L

鸟嘌呤 5.5 ~ 8.5mg/L

尿嘧啶 5.5 ~ 8.5mg/L

胸腺嘧啶 0.25 ~ 1.5mg/L

胞嘧啶 5.5 ~ 8.5mg/L

核糖 2.0 ~ 8.5mg/L

脱氧核糖 2.0 ~ 8.5mg/L

酚红 0.001 ~ 0.005mg/L

地塞米松 0.01~0.05mg/L

孕酮 2.0 ~ 8.5mg/L

亚油酸 0.05 ~ 0.50ul/L

亚麻酸 0.005 ~ 0.050ul/L

硬脂酸 0.005 ~ 0.050mg/L

棕榈油酸 0.05 ~ 0.50ul/L

油酸钠 0.005 ~ 0.050mg/L

豆蔻酸钠 0.005 ~ 0.050mg/L。

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