[发明专利]一种聚乙二醇水解无色杆菌PEGHB-04及其应用有效
| 申请号: | 201310083223.4 | 申请日: | 2013-03-15 |
| 公开(公告)号: | CN103146615A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
| 发明(设计)人: | 陈立伟;李根;蔡天明;胡江;张金;杨倩 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A62D3/02;C12R1/025;A62D101/28 |
| 代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 顾进 |
| 地址: | 21009*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 聚乙二醇 水解 无色 杆菌 peghb 04 及其 应用 | ||
1.一株聚乙二醇水解无色杆菌(Achromobacter sp.)菌株PEGHB-04,其保藏编号为CGMCC NO.7142。
2.权利要求1所述的无色杆菌PEGHB-04在聚乙二醇水解中的应用。
3.权利要求1所述的无色杆菌PEGHB-04水解聚乙二醇的方法,包括如下步骤:
1)将纯化得到的菌株挑至诱导培养基中,于30℃、160r/min振荡培养至菌体生长对数后期,即OD600≈2.5;
2)将步骤1)得到的培养液在离心力6000g下离心3min,弃上清液,加入等体积的100mmol/L,pH7.0的磷酸缓冲液PBS摇匀后,在离心力6 000g下离心3min,以此方法冲洗2次,然后用100ml无机盐液体培养基重悬;
3)在步骤2)的100ml重悬液中加入0.5g PEG1000,即聚乙二醇1000,并于30℃、160r/min下振荡18 h。
4.根据权利要求3所述的水解聚乙二醇的方法,其特征在于:步骤1)中所述的诱导培养基的组成为:PEG1000 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,酵母膏 4.0g,去离子水 1000ml,pH 7.0。
5.根据权利要求3所述的水解聚乙二醇的方法,其特征在于:所述步骤2)中的无机盐液体培养基为:每升去离子水中含1.50 g K2HPO4、0.50 g KH2PO4、0.20 g MgSO4×7H2O、1.00 g NaCl、1.00 g (NH4)2SO4,pH 7.0。
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