[发明专利]突变型OsGBSS1酶及其制备方法与用途

权利要求书

1.一种颗粒结合淀粉合成酶，其特征在于，所述酶在对应于SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的一个或多个选自下组的氨基酸位点中发生突变：

(a)H236、N265、Y268、N353、R408、E410、K413或C487；

(b)A114、EA314-315或T543；或

(c)上述(a)或(b)的任意组合。

2.如权利要求1所述的颗粒结合淀粉合成酶，其特征在于，所述突变是：H236Y、N265D、Y268F、Y268W、N353A、R408A、E410D、E410Q、C487A、K413A、A114S、EA314-315QT或T543A。

3.编码权利要求1或2所述颗粒结合淀粉合成酶的多核苷酸。

4.包含权利要求3所述多核苷酸的表达载体。

5.包含权利要求3所述多核苷酸或权利要求4所述表达载体的植物细胞。

6.一种调节颗粒结合淀粉合成酶活性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)将待调节活性的颗粒结合淀粉合成酶的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示氨基酸序列作序列比对；

(2)根据调节需要从下表中选择相应的位点进行突变：

和/或根据调节需要从下表中选择相应的位点进行突变

和；

(3)任选的检测所得突变体的比酶活的步骤。

7.一种制备颗粒结合淀粉合成酶活性受调节的转基因水稻的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)将待调节活性的颗粒结合淀粉合成酶的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示氨基酸序列作序列比对；

(2)根据调节需要从下表中选择相应的位点进行突变：

和/或根据调节需要从下表中选择相应的位点进行突变

；

(3)制备编码包含相应突变的氨基酸序列的多核苷酸或包含所述多核苷酸的表达载体；和

(4)将(3)所得多核苷酸或表达载体转入水稻。

8.调节水稻中直链淀粉含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)将待调节直链淀粉含量的水稻植株的OsGBSS1的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示氨基酸序列作序列比对；

(2)根据调节需要从下表中选择相应的位点：

或根据调节需要从下表中选择相应的位点进行突变

；

(3)制备编码包含相应突变的氨基酸序列的多核苷酸或包含所述多核苷酸的表达载体；

(4)将(3)所得多核苷酸或表达载体转入水稻；和

(5)任选的检测所得水稻中OsGBSS1的比酶活或所得水稻中直链淀粉含量的步骤。

9.一种生产直链淀粉含量受调节的稻米的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)培养权利要求7所得的转基因水稻；和

(2)获得所述转基因水稻产生的稻米。

10.如权利要求1所述的颗粒结合淀粉合成酶或权利要求3所述的编码多核苷酸的用途，其特征在于，所述酶在对应于SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的一个或多个选自A114、EA314-315或T543的氨基酸位点中发生突变，所述颗粒结合淀粉合成酶或其编码多核苷酸作为分子标记用于制备通过特异性识别A114、EA314-315或T543位点的氨基酸突变来鉴别水稻品种的试剂或试剂盒。

11.一种鉴别水稻品种的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)鉴定待鉴别水稻的GBSS1氨基酸序列中A114、EA314-315或T543位点的氨基酸、GBSS1比酶活或该水稻的直链淀粉含量；

(2)根据下表判断所鉴别的水稻属于下表中哪一品种。