[发明专利]尿微量白蛋白检测方法和试剂盒

权利要求书

1.一种检测尿微量白蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：

（1）用pH5.0～8.2的含有金属离子的缓冲溶液和微量白蛋白配制尿微量白蛋白浓度不同的多个标准溶液；

（2）在所述多个标准溶液中加入等量的菁染料和含有金属离子的缓冲溶液，得到多个标准比色溶液；

（3）在待测液体样品中加入菁染料和含有金属离子的缓冲溶液，以使待测样品中菁染料的浓度以及pH值与标准比色溶液的相同，从而得到测试溶液；

（4）将测试溶液与步骤（2）中获得的标准比色溶液的颜色进行对比，从标准比色溶液中找出与测试溶液的颜色一致或接近的标准比色溶液，则该标准比色溶液所对应的标准溶液的尿微量白蛋白浓度与待测液体的尿微量白蛋白浓度一致或接近。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述菁染料为式I的化合物，

式I

其中：R₁为C₁-C₆的烷基、苯基、烷基取代的苯基；R₂、R₃、R₄和R₅独立地选自H或C₁-C₆的烷基，或者R₂和R₃与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构，或者R₄和R₅与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构；R₆和R₇为C₁-C₆烷基或者磺酸基取代的C₁-C₆烷基；Y为反离子，根据R₆和R₇所带电荷的不同而不同，若R₆和R₇为烷基，则Y为卤素阴离子；若R₆和R₇只有一个带有磺酸根，则无需Y作为反离子；若R₆和R₇均带有磺酸根，则Y为三乙胺阳离子；X₁，X₂独立地选自C、O、S、Se或Te。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述C₁-C₆的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基或异己基。

4.如权利要求2所述的方法，其中R₁选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基、异己基、苯基、甲基苯基或二甲基苯基；R₂、R₃、R₄和R₅独立地选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基或异己基。

5.如权利要求2所述的方法，其中所述5元至7元环结构为含有或不含有N或S原子的饱和或不饱和环结构。

6.如权利要求2所述的方法，其中Y选自氟、氯、溴、碘阴离子或三乙胺阳离子。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述含有金属离子的缓冲液选自磷酸钾-磷酸氢钾缓冲液、磷酸钠-磷酸氢钠缓冲液、巴比妥钠-盐酸缓冲液、巴比妥钾-盐酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钾缓冲液、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液、硼砂-氢氧化钠缓冲液或磷酸钠缓冲液或者添加有水溶性金属盐的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液、三乙醇胺缓冲液、咪唑-盐酸缓冲液、双甘氨肽缓冲液、2-氨基-2-甲基-1-丙醇缓冲液；所述缓冲液的缓冲剂浓度在1～50mmol/L的范围。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述水溶性金属盐为水溶性的碱金属盐或碱土金属盐；所述水溶性金属盐在缓冲溶液中的浓度在1～50mmol/L的范围。

9.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述标准溶液中尿微量白蛋白浓度在0至1000mg/L的范围，优选在0~600mg/L的范围，进一步优选在0~400mg/L的范围；所述菁染料在所述标准比色溶液中的浓度在1至30μmol/L的范围，优选在3~20μmol/L的范围。