[发明专利]一种人巨细胞病毒HCMV检测试剂盒有效
| 申请号: | 201310009151.9 | 申请日: | 2013-01-10 |
| 公开(公告)号: | CN103122396A | 公开(公告)日: | 2013-05-29 |
| 发明(设计)人: | 戴立忠;邓中平;艾颖娟 | 申请(专利权)人: | 湖南圣湘生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人: | 吴大建;欧颖 |
| 地址: | 410012 湖南省长沙*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 巨细 病毒 hcmv 检测 试剂盒 | ||
1.一种核酸释放剂在人巨细胞病毒HCMV检测中的应用,所述核酸释放剂包含莎梵婷(surfactin)0.01~0.5mM/L,氯化钾20~300mM/L,十二烷基磺酸钠0.01~2%和乙醇0.05~1%。
2.一种人巨细胞病毒HCMV检测试剂盒,所述试剂盒中包括核酸释放剂和PCR反应液,所述核酸释放剂包含莎梵婷(surfactin)0.01~0.5mM/L,氯化钾20~300mM/L,十二烷基磺酸钠0.01~2%和乙醇0.05~1%;所述PCR反应液中包含用于靶多核苷酸扩增的上游引物、下游引物和用于靶多核苷酸检测的探针。
3.根据权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,用于靶多核苷酸的上游引物序列为5’-CAGATTCTTTGGACGGACAGACT-3’;用于靶多核苷酸的下游引物序列为5’-AGTGTCGGT AGCCGTTTTTGC-3’。
4.根据权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于,用于靶多核苷酸的探针序列为5’-CCCAACCTGCTAGACCGACTGCGA-3’。
5.根据权利要求2~4中任意一项所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括用于将未知样本浓缩的HCMV浓缩液,所述HCMV浓缩液包括10~100mM/L的聚乙二醇6000和50~500mM/L的氯化钠溶液。
6.根据权利要求2~4中任意一项所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括内标,所述内标的序列为5’-CACCACTTAAATCCTAAGGTTCCAGCTCTGTCATCCAGTTTTGCTGACTCACGTATTCGTAGCCAATCTTCTGGAGGTGCAATCTCAATTATGTCATCAG-3’。
7.根据权利要求6所述的检测试剂盒,其特征在于,所述PCR反应液中还包括用于内标检测的上游引物、下游引物和探针;且内标上游引物序列为5’-CACCACTTAAATCCTAAGGTTCCAG-3’,内标下游引物序列为5’-CTGATGACATAATTGAGATTGCACC-3’,内标探针序列为5’-TTTTGCTGACTCACGTATTCGTAGCCAA–BHQ1-3’。
8.根据权利要求2~4中任意一项所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括酶混合液,所述酶混合液中包含耐热DNA聚合酶(Taq酶)和0.5~2U/μl的尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG酶),同时在所述PCR反应液中还包含dUTP。
9.一种HCMV检测试剂盒,所述试剂盒中包括PCR反应液,所述PCR反应液中包含用于靶多核苷酸扩增的上游引物、下游引物和用于靶多核苷酸检测的探针,且用于靶多核苷酸的上游引物序列为5’-CAGATTCTTTGGACGGACAGACT-3’;下游引物序列为5’-AGTGTCGGTAGCCGTTTTTGC-3’。
10.一种HCMV检测试剂盒,所述试剂盒中包括PCR反应液,所述PCR反应液中包含用于靶多核苷酸扩增的上游引物、下游引物和用于靶多核苷酸检测的探针,且用于靶多核苷酸的探针序列为5’-CCCAACCTGCTAGACCGACTGCGA-3’。
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