[实用新型]转基因成分四联检测试剂盒

说明书

技术领域：

本实用新型涉及一种转基因成分四联检测试剂盒。

背景技术：

在转基因生物的研究工作中，或在对转基因产品进行筛选或安全性评价时，需要进行外源性基因的检测。而目前常发生一种宿主细胞(包括原核和真核细胞)转入了2种以上外源基因的情况，有时甚至多达3～4种。因此，往往需要对转入的多种外源性基因分别进行定性或半定量测定，操作很繁琐，检测成本高。

例如转植物的抗草甘膦EPSPS蛋白的检测。研究表明来源于不同原核生物的EPSPS的氨基酸同源性较低，如Mosanto公司广泛使用的来源于根癌农杆菌CP4的EPSPS与本实验室克隆的来源于施氏假单胞菌A1501的EPSPS的氨基酸同源性为45.18％，与克隆自土壤宏基因组GR79-EPSPS同源性为19.75％，与克隆自荧光假单胞菌G2的EPSPS的同源性为24.17％；另外，A1501-EPSPS与GR79-EPSPS同源性为23.58％，A1501-EPSPS与G2-EPSPS的同源性为24.69％；GR79-EPSPS与G2-EPSPS的同源性为29.89％，且它们的多克隆抗体不发生交叉反应。目前，本实验室克隆的这几个基因已分别被转入玉米、棉花、大豆、烟草、油菜、水稻等作物，部分转基因作物(例如转G2-EPSPS玉米)已进入生产性试验阶段，商品化生产蓄势待发。因此，实践中对转基因抗草甘膦除草剂植物样本往往都需要进行多种基因的检测。

已有试纸条检测的方法虽可部分克服以上不足，但单一抗体检测试纸条只能检测转基因作物中单一种类的外源基因，实际操作中容易产生漏检等错误结果。例如：如果检测者仅用检测CP4-EPSPS试纸条，则不能检测转入GR79-EPSPS或A1501-EPSPS或G2-EPSPS基因的植物，可能会得出检测对象不存在外源基因的错误结果，造成不必要的损失。而且在操作时，需要将试纸条浸入待检测的液体中，操作不是很方便。

因此，实践中很需要有一种可同时检测转基因植物中不同的EPSPS蛋白，且操作简便、结果准确可靠、快速的装置。

实用新型内容：

本实用新型的目的是建立一种操作简便、结果准确可靠、快速，并能同时检测4种不同转基因成分的检测试剂盒。

本实用新型的技术方案是这样的：它包括底板和上盖，底板盖入上盖后组成试剂盒，其特征在于底板上放置有4条测试带；上盖有4个观测窗和1个加样孔。

底板的上表面可以设置4条凹槽，每条凹槽内嵌入一条测试带，底板的厚度不限。

所述底板或上盖可具有卡槽，以保证底板与上盖扣紧。

所述观测窗优选是长方形。

试剂盒的形状为扁平的多边形或圆形盒。

本实用新型的目的是这样实现的：当底板盖入上盖后，每个观测窗对应一条测试带，通过盒盖上的单一的加样孔及4个观测窗可进行加样和观察检测结果，每个观测窗可分别检查一种基因。

在本实用新型的一个优选的实例中，以转植物的抗草甘膦EPSPS蛋白的检测为例：

试剂盒为正八边形扁盒，盒底板的上、下、左、右各设置有一条凹槽，可放置4条测试带；上盖与测试带相应位置有4个观测窗，1个加样孔设置在上盖最中间(见图1、图2)。

4条测试带以此种方式分布，一是加样方便，一次加样可保证4条测试带同时加样，以检查4种基因，二是检测结果互不受影响。

上述4条测试带，一条用于检测CP4-EPSPS蛋白，一条用于检测G2-EPSPS蛋白，另两条分别用于检测A1501-EPSPS和GR79-EPSPS蛋白。所述测试带是一种具有检测系统主体膜反应体系功能的检测材料，由高分子纤维膜、塑料等多层材料制成。4种蛋白的测试带均可分为质控区和检测区，质控区可包被羊抗鼠IgG或兔抗鼠IgG多克隆抗体；CP4-EPSPS蛋白测试带的样品检测区包被特异功能性CP4-EPSPS，G2-EPSPS蛋白测试带的样品检测区包被G2-EPSPS，A1501-EPSPS蛋白测试带的样品检测区包被特异功能性A1501-EPSPS，GR79-EPSPS蛋白测试带的样品检测区包被特异功能性GR79-EPSPS的单克隆抗体或多克隆抗体。

每个观测窗分为测试区(T)和质控区(C)两部分，可在上盖上用字母C、T标示出；

检测时，将送检物品的提取液一次性滴加在试剂盒的单一加样孔中，5--10分钟后，通过肉眼就可以通过上盖的观测窗直接观察到准确的检测结果。

对于每个观测窗来说，用以下方式判断检测结果：

1、阴性(-)：

反应状况：观测窗质控区(C)出现一条紫红色条带。