[发明专利]黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL及其编码基因和应用

说明书

技术领域

本发明属于植物基因工程领域，涉及一种黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL及其编码基因和应用。

背景技术

环境中的非生物胁迫，例如干旱、盐碱、冷害和热害等影响植物的生长和发育，造成农作物的减产，也影响林木、果树、花卉、园艺观赏植物的正常生长和品质，培育耐逆的植物品种是种植业的主要目标之一。然而，植物耐逆性是一个数量性状，涉及至少几百个基因的作用，因此从耐逆性强的植物中分离耐性基因是十分必要的。

脂质转运体（lipocalins）是一个广泛分布于生物界蛋白家族（Akerstrom et al.2000），但这个蛋白家族成员的氨基酸序列同源性低，其功能是运输疏水性化合物（Flower et al.2000）。植物脂质运载蛋白可分为两大类：温度诱导的脂质转运体(temperature induced lipocalins，TIL)和叶绿体脂质转运体(chloroplastic lipocalins，CHLs)(Charron et al.2005)。

植株中的脂质转运体的研究并不多。主要在模式植物拟南芥有过研究，TIL基因受低温和高温诱导（Charron et al.2002），具有抗温度胁迫的功能（Charron et al.2008；Chi et al.2009）。黄花苜蓿（Medicago sativa subsp.falcata)是一种非常耐寒的豆科牧草种质，在寒冷的西伯利亚也有分布，从中克隆抗寒基因，能为转基因育种提供更为优良的目的基因，而且对于农林植物抗逆分子育种尤为重要和迫切。

发明内容

为克服现有技术的缺点和不足，本发明的首要目的是提供一种黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL。

本发明的另一目的在于提供编码所述的黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL的基因。

本发明的再一目的在于提供所述的黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL，其氨基酸序列如下所示：

MGNTVGKDKEVVKGVDLERYMGRWYEIASFPSFFQPKNGENTRATYTLNSDGTVHVLNETWNGGKRTSIEGSAYKADPKSDEAKLKVKFYVPPFLPIIPAVGDYWILYLDQDYQYALIGGPTNKYLWILCRQPHLDEAIYNQLVEKAKEEGYDVSKLHKTPQSDPPPE；

编码所述的黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL的核苷酸序列如下所示：

ATGGGAAACACCGTAGGGAAGGACAAGGAGGTTGTGAAGGGTGTAGACTTGGAGAGGTACATGGGTAGGTGGTATGAGATAGCTTCTTTCCCTTCATTCTTCCAGCCCAAAAATGGAGAGAACACAAGAGCCACATACACTCTCAACAGTGATGGGACTGTTCATGTTCTCAACGAGACTTGGAATGGTGGTAAAAGAACCTCCATAGAAGGAAGTGCTTATAAAGCTGACCCCAAAAGTGATGAAGCCAAGCTCAAGGTTAAATTCTATGTTCCTCCATTCTTGCCAATTATTCCTGCTGTTGGAGATTACTGGATTTTGTACCTTGATCAAGATTATCAATATGCTCTCATTGGTGGGCCTACCAATAAATATCTATGGATACTATGCAGGCAACCCCATTTGGATGAAGCAATCTACAACCAGCTTGTTGAGAAAGCTAAGGAAGAAGGCTATGATGTGAGTAAATTGCACAAGACTCCACAGAGTGATCCTCCACCTGAGTAA；

上述黄花苜蓿温度诱导的脂质转运体MfTIL在提高植物抗寒性中的应用：该应用包括用本发明的MfTIL基因构建植物表达载体；用构建的表达载体转化植物组织；将转化的植物组织培育成转基因植株。

所述的用本发明的MfTIL基因构建植物表达载体，可用现有的植物表达载体构建含有所述基因的重组表达载体；

所述植物表达载体包括但不限于双元农杆菌载体以及用于单子叶基因枪转化的载体；所述的双元农杆菌载体包括pBI121，pCAMBIA系列载体；所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它效应mRNA加工或基因表达的DNA片段；