[发明专利]环磷酰胺抗肿瘤药物敏感度检测方法无效
| 申请号: | 201210557013.X | 申请日: | 2012-12-20 |
| 公开(公告)号: | CN102994642A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
| 发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 上海迪道科技有限公司;郭景康 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
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| 地址: | 201203 上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 环磷酰胺抗 肿瘤 药物 敏感度 检测 方法 | ||
1.一种用于环磷酰胺抗肿瘤药物敏感度检测的PCR扩增引物,其特征在于,包含SEQ ID No.1 ~4所示的上游引物和SEQ ID No.5~8所示的下游引物。
2.一种用于环磷酰胺抗肿瘤药物敏感度检测的引物单碱基延伸引物,其特征在于,包含SEQ ID No.9~12所示的单碱基延伸引物。
3.一种用于环磷酰胺抗肿瘤药物敏感度检测的方法,其特征在于,由PCR扩增试剂组、SAP试剂组、iPLEX试剂组构成,包括:
1)PCR扩增试剂组含有:PCR缓冲液、MgCl2、dNTP混合液、Hotstar Taq酶、纯水和如 SEQ ID No.1 ~4所示的上游引物和如SEQ ID No.5~8所示的下游引物;
2)SAP酶试剂组含有:SAP缓冲液、SAP酶和纯水;
3)iPLEX试剂组含有:iPLEX缓冲液、ddNTP混合液、iPLEX聚合酶、纯水和如SEQ ID No.9~12所示的单碱基延伸引物。
4.根据权利要求3所述的方法制造系列试剂盒包括:
1)根据权利要求3所述方法制造的试剂盒,所述的PCR扩增缓冲液为10×缓冲液,含2mM MgCl2;
2)根据权利要求3所述方法制造的试剂盒,其特征是,所述的MgCl2浓度为2mM;
3)根据权利要求3所述的方法制造试剂盒,其特征是,所述的dNTP混合液的浓度为500μM;
4)根据权利要求3所述的方法制造试剂盒,其特征是,所述的Hotstar Taq酶为0.5U;
5)根据权利要求3所述的方法制造试剂盒,其特征是,所述的SAP缓冲液为10X缓冲液;
6)根据权利要求3所述的方法制造试剂盒,其特征是,所述的SAP酶为1.7 U/μL的虾碱性磷酸酶;
7)根据权利要求3所述方法制造的试剂盒,其特征是,所述的iPLEX缓冲液10×缓冲液;
8)根据权利要求3所述方法制造的试剂盒,其特征是,所述的ddNTP 混合液为经过质量修饰的核苷酸;
9)根据权利要求3所述的方法制造试剂盒,其特征是,所述的单碱基延伸酶为iPLEX聚合酶。
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