[发明专利]聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒及在低聚果糖生产中应用

权利要求书

1.一种聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）用水将聚氨酯光交联树脂预聚物配制成浓度为质量百分比25～45%的聚氨酯光交联树脂预聚物水溶液；

（2）往步骤（1）制备的聚氨酯光交联树脂预聚物水溶液中加入光敏剂安息香乙醚，安息香乙醚的用量为体积百分比1%；蒸汽灭菌后，冷却，加入果糖基转移酶溶液和葡萄糖异构酶溶液；搅拌均匀后，倒入玻璃模框摊平，用波长365nm、功率100W的紫外光距离玻璃模框25厘米处照射，待胶体凝固后即得聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒。

2.根据权利要求1所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的聚氨酯光交联树脂预聚物的主链为聚醚聚氨酯结构，末端为含C=C双键的甲基丙烯酸酯基团，分子量为4000。

3.根据权利要求1所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的果糖基转移酶溶液和所述的葡萄糖异构酶溶液的用量按果糖基转移酶和葡萄糖异构酶的酶活力比值为4:1～2:1进行配比。

4.根据权利要求1所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的果糖基转移酶溶液为果糖基转移酶纯溶液，或为果糖基转移酶和产果糖基转移酶的微生物细胞混合得到的溶液；

步骤（2）中所述的葡萄糖异构酶溶液为葡萄糖异构酶纯溶液，或为葡萄糖异构酶和产葡萄糖异构酶的微生物细胞混合得到的溶液。

5.根据权利要求4所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒的制备方法，其特征在于：所述的果糖基转移酶溶液通过如下方法制备得到：将保藏于位于中国武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2012年4月10日，保藏编号为CCTCC NO:M2012106的米曲霉（Aspergillus oryzae）scut209菌株接种于种子培养基中，30℃振荡培养36h，然后接种于100.0ml发酵培养基中，30℃、200r/m振荡培养48h，离心收集菌丝体，蒸馏水洗涤两次后，加入10.0ml浓度为0.05mol/L、pH6.0的磷酸盐缓冲液，于冰浴条件下，用超声波破碎细胞，得到果糖基转移酶溶液；

其中，种子培养基的组成如下：白砂糖的终浓度为质量百分比3.0%，营养肉汤的终浓度为质量百分比3.6%，自然pH；发酵培养基的组成如下：白砂糖的终浓度为质量百分比5.0%，豆粕粉的终浓度为质量百分比2.0%，玉米粉的终浓度为质量百分比0.3%，自然pH。

6.根据权利要求5所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒的制备方法，其特征在于：所述的超声波的操作参数为570W；方式：破碎9秒，间歇5秒；时间：30分钟。

7.一种聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒，由权利要求1～6任一项所述的制备方法得到。

8.权利要求7所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒在低聚果糖生产中应用，其特征在于包含以下步骤：

I、将蔗糖溶解于浓度为0.05mol/L、pH6.0的磷酸盐缓冲液中，得到转化底物蔗糖溶液；

II、往转化底物蔗糖溶液中加入所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒，再加入Mg²⁺、S₂O₄^2-作为激活因子，振荡反应，得到低聚果糖。

9.根据权利要求8所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒在低聚果糖生产中应用，其特征在于：步骤I中所述的转化底物蔗糖溶液的浓度为质量百分比40%；

步骤II中所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒的用量为相当于步骤I中所述的蔗糖的质量的1/8；

步骤II中所述的振荡反应的条件为于44～46℃振荡反应。

10.根据权利要求8所述的聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒在低聚果糖生产中应用，其特征在于：步骤II中所述的Mg²⁺的浓度为4.06mmol/L；

步骤II中所述的S₂O₄^2-的浓度为1.03mmol/L；

步骤II中所述的振荡反应的条件为于44～46℃、150～200rpm振荡反应6～8h。