[发明专利]双峰驼α-乳白蛋白基因、重组蛋白及其克隆方法无效
| 申请号: | 201210478257.9 | 申请日: | 2012-11-22 |
| 公开(公告)号: | CN103014007A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
| 发明(设计)人: | 陈钢粮 | 申请(专利权)人: | 新疆旺源驼奶实业有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C07K14/47;C12N15/10 |
| 代理公司: | 乌鲁木齐合纵专利商标事务所 65105 | 代理人: | 汤洁 |
| 地址: | 836400 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 双峰驼 乳白 蛋白 基因 重组 及其 克隆 方法 | ||
1.一种双峰驼α-乳白蛋白基因,其特征在于该基因是一种乳品中除具有易消化吸收的特点外、还具有杀菌和诱导肿瘤细胞凋亡的功能密切相关的基因,具有SEQ ID NO.1中从核苷酸第4-432位的核苷酸序列。
2.一种根据权利要求1所述的双峰驼α-乳白蛋白基因的重组蛋白。
3.根据权利要求2所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。
4. 根据权利要求2或3所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
5.根据权利要求2或3所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。
6.根据权利要求4所述的重组蛋白,其特征在于该重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。
7.根据权利要求2或3所述的重组蛋白,其特征在于通过设计一对引物从双峰驼α-乳白蛋白中得到双峰驼α-乳白蛋白基因,该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4,其序列信息如下:
SEQ ID NO.3:5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’,
SEQ ID NO.4:5’- TATTCTGTGCTGTCATTGTTTTG -3’。
8.根据权利要求4所述的重组蛋白,其特征在于通过设计一对引物从双峰驼α-乳白蛋白中得到双峰驼α-乳白蛋白基因,该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4,其序列信息如下:
SEQ ID NO.3:5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’,
SEQ ID NO.4:5’- TATTCTGTGCTGTCATTGTTTTG -3’。
9.根据权利要求5或6所述的重组蛋白,其特征在于通过设计一对引物从双峰驼α-乳白蛋白中得到双峰驼α-乳白蛋白基因,该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4,其序列信息如下:
SEQ ID NO.3:5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’,
SEQ ID NO.4:5’- TATTCTGTGCTGTCATTGTTTTG -3’。
10.一种根据权利要求1所述的双峰驼α-乳白蛋白基因的克隆方法,按下述步骤进行:第一步,组织分离(Isolation);第二步,总RNA的分离(Total RNA isolation),总RNA的分离(Total RNA isolation)包括提取RNA的准备工作、组织总RNA提取、组织总RNA的鉴定;第三步,全长cDNA的克隆(Cloning of Full-length cDNA),全长cDNA的克隆(Cloning of Full-length cDNA)包括引物设计及合成、RT-PCR扩增、克隆和测序,该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4,其序列信息如下:
SEQ ID NO.3:5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’,
SEQ ID NO.4:5’- TATTCTGTGCTGTCATTGTTTTG -3’。
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