[发明专利]用于疾病筛查的血样采集卡及含有该血样采集卡的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于疾病，特别是遗传性疾病筛查的血样采集卡及含有该血样采集卡的试剂盒。

背景技术

新生儿疾病筛查是指对刚出生的宝宝，通过实验室检测技术发现某些危害严重的先天性遗传代谢性疾病，从而早期诊断、早期治疗，避免宝宝因脑、肝、肾等损害导致智力、体力发育障碍甚至死亡。

血样采集卡是新生儿疾病筛查主要血液样本保存的载体之一，目前大多使用进口的FTA卡或进口903滤纸作为载体，价格高昂且受制于国外货源，为避免出现因进口货源紧张从而影响我国新生儿疾病筛查的血样采集工作开展，亟待开发一种原料易得且价格低廉的遗传性疾病血样采集卡及与其相适用的DNA提取方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于疾病，特别是遗传性疾病筛查的血样采集卡。

本发明的另一目的是提供含有上述血样采集卡的用于血样DNA提取的试剂盒。

为了实现本发明目的，本发明的一种用于疾病筛查的血样采集卡，包括用于吸附血液样本的吸附材料和纸张，所述吸附材料附着于纸张一侧，吸附材料上印刷有采集圈，所述纸张包含如下信息：个人信息登记、采血方法及注意事项；所述用于吸附血液样本的吸附材料可以是任何能够吸附血液的片状材料，包括各种纸张和布料等材料，如棉质布料、书写纸、定性滤纸、定量滤纸、903#滤纸或生活卫生用纸等。

其是采用粘贴、装订或缝合等方法使吸附材料附着于纸张上。

所述血样采集卡由无菌塑料袋封装，有效防止血样与异物接触或被挤压破损而污染。优选在所述无菌塑料袋内添加少量防潮剂。

前述的血样采集卡，所述采集圈的形状为圆形或其它几何形状。优选所述采集圈为直径1.5cm的圆形，采集圈的数量为3-5个。可将约50μl抗凝全血滴至圆形采集圈中心，抗凝全血扩散边缘应不超过采集圈边缘，即全血扩散直径不超过1.5cm。

前述的血样采集卡，记录采样对象相关信息的纸张为无碳复写三联单，记录内容详细具体并有电子版备份，可设有条形码粘贴处，通过条形码扫描便于查找样本记录信息。对于医疗条件比较差的地区，采集的血样不能被及时检测的，可将血液样本滴在血样采集卡上保存，然后运输或邮寄送往具备检测手段和设施的单位进行检测。

本发明还提供含有上述血样采集卡述的用于血样DNA提取的试剂盒。该试剂盒还含有组织消化液、LiCl溶液、蛋白酶K和TE溶液。其中，组织消化液为8mM Tris-HCl+8mM EDTA+8mM NaCl+0.5%SDS；LiCl溶液6.5mol/l；蛋白酶K 20mg/ml；TE溶液为10mMTris-HCl+0.1mM EDTA。

本发明还提供上述试剂盒在提取血样DNA中的应用。包括步骤：

1)用血样采集卡采集血样，室温保存；

2)将干血片置于离心管中；

3)向离心管中加入组织消化液，再加入蛋白酶K，震荡；

4)置于50℃水浴中消化，消化过程中颠倒混匀；

5)消化后，加入LiCl溶液，震荡，冰浴；

6)13000rpm离心10分钟，取500μl上清移入另一离心管中；

7)加入1ml冰预冷的无水乙醇，颠倒混匀后室温放置10分钟；

8)13000rpm离心10分钟，弃上清，加入1ml冰预冷70%乙醇，颠倒混匀；

9)13000rpm离心5分钟，弃上清，瞬时离心1次，去除残留乙醇，室温干燥至乙醇挥发完全；

10)用TE溶液或水溶解DNA。

具体地，利用上述试剂盒提取血样DNA，包括如下步骤：

1)用血样采集卡采集血样，每片50μl，室温保存；

2)将1片干血片置入1.5ml离心管中；

3)向离心管中加入350μl组织消化液，再加入5μl蛋白酶K，用涡旋混合器震荡5秒钟；

4)置于50℃水浴中消化2小时，分别在消化30分钟、60分钟时颠倒混匀；

5)消化2小时后，每管加入300μl LiCl溶液，用涡旋混合器震荡5秒钟，冰浴10分钟；

6)13000rpm离心10分钟，取500μl上清移入另一离心管中；

7)加入1ml冰预冷的无水乙醇，颠倒混匀后室温放置10分钟；

8)13000rpm离心10分钟，弃上清，加入1ml冰预冷70%乙醇，颠倒混匀；

9)13000rpm离心5分钟，弃上清，瞬时离心1次，去除残留乙醇，室温干燥30分钟至乙醇挥发完全；