[发明专利]小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统及制备方法

权利要求书

1.小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统，其特征在于，以壳聚糖为传递主体，以所述传递系统的总重量为基准，含有0.5~2.0%的小分子干扰核糖核酸和10%～25%的多聚磷酸钠，所述纳米粒冻干前后粒径为60~200nm，Zeta电势10～70mV。

2.根据权利要求1所述的小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统，其特征在于，含有1.0～1.5%的小分子干扰核糖核酸和12%～18%的多聚磷酸钠，冻干前后粒径为80~150nm，Zeta电势20～40mV。

3.小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统，其特征在于，以壳聚糖为传递主体，以所述传递系统的总重量为基准，含有0.5~2.0%的小分子干扰核糖核酸和10%～25%的多聚磷酸钠以及载体，所述载体选自环糊精衍生物或海藻糖中的一种以上，所述载体与壳聚糖、小分子干扰核糖核酸和多聚磷酸钠总重量之比为：

载体∶总重量=20～100∶1；

所述纳米粒冻干前后粒径为60~200nm，Zeta电势10～70mV。

4.根据权利要求3所述的小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统，其特征在于，含有1.0～1.5%的小分子干扰核糖核酸和12%～18%的多聚磷酸钠以及载体，所述载体选自环糊精衍生物或海藻糖中的一种以上，所述载体与壳聚糖、小分子干扰核糖核酸和多聚磷酸钠总重量之比为：载体∶总重量=50～70∶1；冻干前后粒径为80~150nm，Zeta电势20～40mV。

5.根据权利要求3所述的小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统，其特征在于，所述载体为环糊精衍生物和海藻糖的混合物，重量比为：环糊精衍生物∶海藻糖=1～3.5∶1，壳聚糖的黏均分子量为5～100万，脱乙酰度为80%以上。 

6.根据权利要求4所述的小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统，其特征在于，所述载体为环糊精衍生物和海藻糖的混合物，重量比为：环糊精衍生物∶海藻糖=1～3.5∶1，壳聚糖的黏均分子量为5～100万，脱乙酰度为80%以上。

7.根据权利要求1～6任一项所述的小分子干扰核糖核酸的壳聚糖纳米粒传递系统，其特征在于，所述小分子干扰核糖核酸为无靶向功能基因的小分子干扰核糖核酸、靶向Bcl-2基因、survivin基因或其他鼻咽癌相关基因的小分子干扰核糖核酸。

8.权利要求1～7任一项所述的小分子干扰核糖核酸的纳米粒传递系统的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将siRNA的DEPC水溶液与多聚磷酸钠的DEPC水溶液混合，滴加入pH4~6壳聚糖的醋酸钠缓冲液，速度为10～25滴/分钟，然后静置20～40min，收集siRNA的纳米粒溶液，再与载体混合，浓缩至原体积的10～30%，-30～25℃程序冻干，获得冻干物，即为所述的小分子干扰核糖核酸的纳米粒传递系统，2～8℃保存，用前DEPC水复溶成所需浓度；冻干物与水的重量比例1:1~1:10；

所述DEPC水，为经焦碳酸二乙酯除核酸酶处理的水，简称DEPC水；

siRNA的DEPC水溶液的浓度为10～40μg/100μl；

多聚磷酸钠的DEPC水溶液的浓度为1～2mg/ml；

壳聚糖的醋酸钠缓冲液中，壳聚糖的浓度为1～2mg/ml；

体积比为：

siRNA的DEPC水溶液∶多聚磷酸钠的EDPC水溶液∶壳聚糖的醋酸钠缓冲液＝1∶1～4∶5～20。