[发明专利]一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法

权利要求书

1.一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将胆管癌细胞株放入含表皮生长因子浓度为5-15μg/ml，药物浓度为0.0005-0.002 μg/ml的培养液中培养2-4天；

2）弃去药物培养液，将步骤1）处理后的胆管癌细胞株放入含表皮生长因子5-15μg/ml，药物浓度增加的培养液中培养2-4天；

3）重复步骤2），直到药物浓度为0.25-0.3 μg/ml；

4）弃去药物培养液，将步骤3）处理后的管癌细胞株放入含表皮生长因子5-15μg/ml，药物浓度降低的培养液中培养2-4天；

5）弃去药物培养液，将步骤4）处理后的管癌细胞株放入含表皮生长因子5-15μg/ml，药物浓度增加的培养液中培养2-4天；

6）重复步骤5），直到药物浓度比步骤3）的药物浓度高0.1-1μg/ml；

7）重复步骤4）、步骤5）和步骤6），每次重复后药物浓度均比上一次重复后的药物浓度高0.1-1 μg/ml，直到药物浓度为0.8-1.5 μg/ml为止。

2.根据权利1所述的一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法，其特征在于，增加药物浓度每次增加0.004-0.25 μg/ml。

3.根据权利1所述的一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法，其特征在于，降低药物浓度每次降低0.1-0.25 μg/ml。

4.根据权利1所述的一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法，其特征在于，胆管癌细胞株在培养液中每次培养3天。

5.根据权利要求1所述的一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法，其特征在于，所述表皮生长因子的浓度为10 μg/ml。

6.根据权利要求1所述的一种人胆管癌多药耐药细胞建立的新方法，其特征在于，所述药物为氮芥、环磷酰胺、博莱霉素、长春新碱、平阳霉素、优福啶、哺氟啶或多柔比星中的任意一种或几种。

7.一种如权利要求1所述方法建立的多药耐药胆管癌细胞。