[发明专利]靶向HIV-1特异siRNA生物纳米粒及其制备和应用

权利要求书

1.一种生物纳米粒，含有靶向HIV-1特异性siRNA，所述siRNA选自SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:6所示序列的1～6种。

2.权利要求1所述的生物纳米粒，还具有以下特征：

1）大小在10-500nm之间；

2）具有人间充质干细胞（Human Mesenchymal Stem Cells,hMSC）外膜；

3）镶嵌病毒的膜蛋白gp120。

3.权利要求1或2所述的生物纳米粒使HIV-1非结构基因沉默的功能，所述非结构基因选自vpr，tat，vif或rev中的一种或多种。

4.权利要求1或2所述的生物纳米粒在制备治疗和预防艾滋病药物中的应用。

5.权利要求1所述的生物纳米粒的制备方法，将含有SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:6所示序列的1～6种的双链DNA构建到永久性表达目的基因的重组慢病毒载体中，在293T细胞中包装出重组慢病毒；用收获的重组病毒感染hMSC，加入嘌呤霉素筛选出表达siRNA的hMSC细胞系，经筛选表达siRNA的hMSC细胞系可以持续高效的表达siRNA；体外连续收获细胞培养液，超速离心浓缩，获得含有siRNA的生物纳米粒。

6.SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:6所示序列的siRNAs。

7.权利要求6所述siRNAs的功能，是使HIV-1非结构基因沉默，每个siRNA针对的靶向HIV-1非结构基因如下所示：

siRNAs序列号靶向HIV-1非结构基因siRNAs序列号靶向HIV-1非结构基因SEQ ID NO:1vprSEQ ID NO:4revSEQ ID NO:2tatSEQ ID NO:5vifSEQ ID NO:3Tat、revSEQ ID NO:6vif。

8.一种可表达HIV-1跨膜蛋白gp120hMSC-env细胞系，名称为hMSC-env，保藏编号为CGMCC NO.6707。

9.权利要求8所述细胞系在制备siRNA的生物纳米粒中的应用。