[发明专利]一种促神经修复材料及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种促神经修复材料，其特征在于：它包括小肠黏膜下层和神经生长因子，所述神经生长因子的含量为1~500pg/cm²。

2.根据权利要求1所述的材料，其特征在于：它是由如下方法制备：

（1）取小肠黏膜下层和雪旺细胞，将雪旺细胞接种于小肠黏膜下层上，共培养，得复合了雪旺细胞的小肠黏膜下层；

（2）将复合了雪旺细胞的小肠黏膜下层反复冻融，冻干，即得所述的材料。

3.根据权利要求2所述的材料，其特征在于：所述步骤（1）中雪旺细胞的接种密度5×10³个/cm²~2.5×10⁵个/cm²；共培养的时间是3~15天。

4.根据权利要求3所述的材料，其特征在于：所述雪旺细胞为采用双酶分步消化法处理大鼠双侧坐骨神经得到的原代细胞或者RSC96大鼠雪旺细胞，接种密度为2.5×10⁵个/cm²或者5×10³个/cm²。

5.根据权利要求4所述的材料，其特征在于：所述双酶分步消化法使用的酶是胰蛋白酶和II型胶原酶。

6.根据权利要求2所述的材料，其特征在于：所述步骤（2）中反复冻融是将复合了雪旺细胞的小肠黏膜下层置于液氮中10分钟，37℃处理10分钟，重复操作3次。

7.根据权利要求2所述的材料，其特征在于：所述步骤（2）中反复冻融是将复合了雪旺细胞的小肠黏膜下层置于液氮中8~12分钟，室温放置15~25分钟，置于摇床上用0.2~0.5%SDS溶液洗涤3~7分钟，去离子水漂洗，重复操作3~5次；再用0.2~0.5%SDS溶液置于摇床上振荡洗涤15~25分钟，去离子水漂洗5~10分钟。

8.一种制备权利要求1~7任意一项所述促神经修复材料的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）取小肠黏膜下层和雪旺细胞，将雪旺细胞接种于小肠黏膜下层上，共培养，得复合了雪旺细胞的小肠黏膜下层；

（2）将复合了雪旺细胞的小肠黏膜下层反复冻融，冻干，即得所述的材料。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）中雪旺细胞的接种密度5×10³个/cm²~2.5×10⁵个/cm²；共培养的时间是3~15天。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述雪旺细胞为采用双酶分步消化法处理大鼠双侧坐骨神经得到的原代细胞或者RSC96大鼠雪旺细胞，接种密度为2.5×10⁵个/cm²或者5×10³个/cm²。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于：所述双酶分步消化法使用的酶是胰蛋白酶和II型胶原酶。

12.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中反复冻融是将复合了原代雪旺细胞的小肠黏膜下层置于液氮中10分钟，37℃处理10分钟，重复操作3次。

13.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中反复冻融是将复合了雪旺细胞的小肠黏膜下层置于液氮中8~12分钟，室温放置15~25分钟，置于摇床上用0.2~0.5%SDS溶液洗3~7分钟，去离子水漂洗，重复操作3~5次；再用0.2~0.5%SDS溶液置于摇床上振荡洗15~25分钟，去离子水漂洗5~10分钟。

14.权利要求1~7任意一项所述促神经修复材料在制备治疗组织缺损的药物中的用途。