[发明专利]再育镰刀菌ZJB-09150及在生物合成烟酸中的应用有效
| 申请号: | 201210386670.2 | 申请日: | 2012-10-12 |
| 公开(公告)号: | CN103045486A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
| 发明(设计)人: | 郑裕国;金利群;柳志强;沈寅初 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P17/12;C12R1/77 |
| 代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;王兵 |
| 地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 镰刀 zjb 09150 生物 合成 烟酸 中的 应用 | ||
1.再育镰刀菌(Fusarium proliferatum)ZJB-09150,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国,武汉,武汉大学,邮编430072,保藏编号CCTCC No:M2011472,保藏日期2011年12月15日。
2.一种权利要求1所述再育镰刀菌ZJB-09150在生物转化合成烟酸中的应用,其特征在于所述应用为:以再育镰刀菌ZJB-09150发酵培养获得的含酶湿菌体为催化剂,以3-氰基吡啶为底物,于pH7.0~10.0的缓冲溶液中构成转化反应体系,在35~55℃条件下进行转化反应,反应完全后,获得的转化反应液即为含烟酸的混合液,将混合液分离纯化,获得所述烟酸。
3.如权利要求2所述再育镰刀菌ZJB-09150在生物转化合成烟酸中的应用,其特征在于所述35~55℃条件下转化反应时间为10~120min。
4.如权利要求2所述再育镰刀菌ZJB-09150在生物转化合成烟酸中的应用,其特征在于所述反应体系中底物的初始终浓度为1.0~5.0g/L,所述再育镰刀菌ZJB-09150发酵培养获得的含酶湿菌体的质量用量以菌体干重计为2.5~5.0g/L。
5.如权利要求2所述再育镰刀菌ZJB-09150在生物转化合成烟酸中的应用,其特征在于所述催化剂按如下步骤获得:
(1)斜面培养:将再育镰刀菌ZJB-09150接种至斜面培养基,在28~30℃培养72~84h,获得斜面菌体;所述斜面培养基的终浓度组成为葡萄糖10.0~20.0 g/L,酵母膏3.0~6.0 g/ L,氯化钠1.0~2.0 g/ L,K2HPO4·3H2O 0.2~0.4 g/ L,MgSO4 0.2~0.4 g/ L,琼脂15.0~20.0 g/ L,pH6.5~7.0,溶剂为水;
(2)种子培养:从斜面菌体挑取一接种环菌体接种至种子培养基,28~30℃培养60~72h,得到种子液;所述种子培养基终浓度组成为:葡萄糖10.0~20.0 g/L,酵母膏3.0~6.0 g/ L,氯化钠1.0~2.0 g/ L,K2HPO4·3H2O 0.2~0.4 g/ L,MgSO4 0.2~0.4 g/ L,pH6.5~7.0,溶剂为水;
(3)发酵培养:将步骤(2)获得的种子液以2~6%体积比接种至发酵培 养基,在28~30℃、初始pH 6.5~7.0条件下震荡培养72~96 h,培养液离心分离,弃去上清,取沉淀即得到所述含酶湿菌体;所述发酵培养基终浓度组成为:蔗糖3.0~6.0 g/ L,牛肉膏2.0~4.0 g/L,NaNO3 2.0~4.0 g/L,K2HPO4·3H2O 0.1~0.2 g/L,MgSO4·7H2O 0.5~1.0 g/L,KCl 0.5~1.0 g/L,FeSO4·7H2O 0.02~0.04 g/L,己内酰胺4.0 ~8.0 g/L,pH 6.5~7.0,溶剂为水。
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