[发明专利]基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法

权利要求书

1.基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：

第一步：金电极的预处理；

第二步：对氨基苯硫酚p-ATP的配制：以无水乙醇为溶剂，向溶剂中加入p-ATP，得到p-ATP的乙醇溶液；

第三步：在金电极上修饰p-ATP：将第一步处理好的金电极在室温下浸泡于p-ATP乙醇溶液中；然后用乙醇和去离子水冲洗，氮气吹干；

第四步：在修饰了p-ATP的金电极上修饰金纳米颗粒；

第五步：DNA适配体的配制与准备；

第六步：在修饰了金纳米颗粒的金电极上修饰DNA适配体；

第七步：除去散乱修饰到金电极表面的DNA适配体；

第八步：进行钾离子的检测。

2.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：所述的金电极预处理，具体为：

(a)在70°C条件下将金电极浸入体积比为3：1的浓H₂SO₄和质量分数为30%的H₂O₂组成的溶液中清洗，然后用二次水冲洗；

(b)然后，金电极要连续的分别用1.0μm，0.3μm和0.05μm的氧化铝粉末在抛光布上抛光；

(c)然后将金电极在乙醇和二次水中超声清洗；

(d)最后，金电极在0.5mol L^-1的H₂SO₄溶液中，在-0.2和+1.6V之间进行循环伏安扫描，直到获得典型的循环伏安谱图，这样一个干净的金电极就得到了。

3.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：第二步中p-ATP的乙醇溶液的浓度为8-12mM。

4.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：第三步中金电极浸泡在p-ATP的乙醇溶液中的时间为24小时以上。

5.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：第四步具体为：将制备好的金纳米颗粒溶胶滴加到修饰了p-ATP的金电极表面，室温下放置10小时以上，直到金电极表面的金溶胶干掉；用水冲洗，并用氮气吹干。

6.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：所述的金纳米颗粒的直径为13-17nm。

7.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：第五步具体为：将含有1mM三（2-羰基乙基）磷盐酸盐及1μM DNA的Tris-HCl缓冲溶液加热70-90℃，恒温保持5-10分钟，然后逐渐冷却到室温。

8.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：第六步具体为：移取15-25μL DNA适配体溶液滴加到第四步处理好的金电极上，在100%湿度条件下室温放置12小时以上，分别用Tris-HCl缓冲液和去离子水冲洗，氮气吹干。

9.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：第七步具体为：滴加15-25μL 1mM的MCH到第六步处理好的电极表面，在100%湿度条件下室温放置30分钟，然后分别用Tris-HCl缓冲液和去离子水冲洗，氮气吹干。

10.根据权利要求1所述的基于G-四链体和金纳米颗粒制备生物传感器检测钾离子的方法，其特征在于：第八步中利用方波伏安法对不同浓度的钾离子进行测量，扫描范围是0-0.6V。