[发明专利]一种细菌生物膜研究模型无效

专利信息
申请号: 201210222025.7 申请日: 2012-06-29
公开(公告)号: CN103509781A 公开(公告)日: 2014-01-15
发明(设计)人: 马小军;宋慧一;于炜婷 申请(专利权)人: 中国科学院大连化学物理研究所
主分类号: C12N11/10 分类号: C12N11/10;C12N11/08;C12N11/04;C12Q1/02;C12R1/19;C12R1/385;C12R1/225;C12R1/07;C12R1/445;C12R1/46
代理公司: 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 代理人: 马驰
地址: 116023 *** 国省代码: 辽宁;21
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摘要:
搜索关键词: 一种 细菌 生物膜 研究 模型
【权利要求书】:

1.一种细菌生物膜研究模型,其特征在于:

由包埋有细菌的海藻酸盐-聚阳离子络合微胶囊形成,并培养得到,微胶囊内细菌菌体增殖后即表现出细菌生物膜特点。

2.按照权利要求1所述的细菌生物膜研究模型,其特征在于:微胶囊内包埋的细菌是任何可以产生生物膜的一种或二种以上细菌;其为大肠杆菌(Escherichia Coli)、绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)、乳酸杆菌(Lactobacillus lactis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)等相关细菌菌株。

3.按照权利要求1或2所述细菌生物膜研究模型,其特征在于:该模型的制备方法如下:

A:按106-108CFU/mL海藻酸钠溶液的初始接种量将细菌细胞混悬在0.1-50g/L海藻酸钠溶液中,制备包埋细菌细胞的海藻酸盐微球,称之为A微球;

B:将上述A微球浸入质量浓度0.1-10%壳聚糖或聚赖氨酸的聚阳离子溶液中,微球与聚阳离子溶液体积比为1:1-1:40,反应1-60分钟,此时得到海藻酸钠-聚阳离子微胶囊;取出用生理盐水洗涤2-3次,称之为B微球;

C:将B微球浸入有机金属螯合剂溶液中,液化微胶囊内部的海藻酸盐凝胶;参与液化反应的有机金属螯合剂溶液为40-70mmol/L的柠檬酸钠或50-200mmol/L的EDTA溶液;B微球与有机金属螯合剂溶液体积比范围为1:1-1:40,反应1-60分钟,取出用生理盐水洗涤,此时得到内部液态核心的微胶囊,称之为C微球;

D:将B微球或C微球按照5-15%的体积接种到相应于可用于细菌细胞培养的培养基中,培养至细菌细胞为1×109-1×1012细胞/毫升微球时结束培养。

4.按照权利要求3所述细菌生物膜研究模型,其特征在于:

所述聚阳离子溶液为质量浓度0.1-10%壳聚糖溶液或质量浓度0.1-10%聚赖氨酸溶液。

5.按照权利要求3所述细菌生物膜研究模型,其特征在于:包埋细菌细胞的海藻酸盐微球的制备方法可采用静电液滴法、锐孔挤出法、乳化-外部凝胶化法、乳化-内部凝胶化法或膜乳化法。

6.按照权利要求3所述细菌生物膜研究模型,其特征在于:

细菌细胞培养基种类、培养温度及培养时间依据所选定的细菌细胞确定。

7.一种权利要求1所述的生物膜模型,其特征在于:该模型可用于细菌生物膜的形成过程、细胞生物膜的特异基因表达及相关信号系统的研究。

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