[发明专利]血管紧张素Ⅰ化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.血管紧张素Ⅰ化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：AngⅠ抗体包被板、辣根过氧化物酶标记的AngⅠ、AngⅠ校准品、AngⅠ质控品、发光液A液和B液、20倍浓缩洗液。

2.根据权利要求1所述的血管紧张素Ⅰ化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述的血管紧张素Ⅰ抗体包被板为包被有AngⅠ抗体的96孔或48孔白色微孔板。

3.根据权利要求1所述的血管紧张素Ⅰ化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述的辣根过氧化物酶纯度要求RZ≥3.0，活性≥250U/mL。

4.根据权利要求1所述的所述的血管紧张素Ⅰ化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述的AngⅠ质控品包括低值质控品和高质质控品，其中低值质控品的浓度范围是0.37～0.55ng/mL，高质质控品的浓度范围是8.28～12.42ng/mL。

5.根据权利要求1所述的血管紧张素Ⅰ化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述的发光液A包含0.7g/L鲁米诺和0.165g/L对碘酚；发光液B包含0.675g/L过氧化脲。

6.根据权利要求1所述的血管紧张素Ⅰ化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述的20倍浓缩洗液包括75.5g/L Tris，120g/L NaCl，5mL/LTween-20，1g/LProclin300。

7.一种制备所述权利要求1的试剂盒的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）AngⅠ抗体包被板制备

将AngⅠ抗体用pH9.6碳酸盐缓冲液稀释至1～10ug/mL，在每个微孔板的孔中加100uL，于4℃冰箱中放置过夜，用洗涤液洗涤五次之后，用牛血清蛋白溶液对微孔板进行封闭，弃去孔内液体后，将酶标板干燥，密封，即得经AngⅠ抗体包被的微孔板； 

2）辣根过氧化物酶标记AngⅠ，得AngⅠ酶结合物；

利用高碘酸钠氧化法，将AngⅠ与辣根过氧化物酶连接在一起，形成经辣根过氧化物酶标记的AngⅠ；

3）AngⅠ校准品；

将AngⅠ用校准品稀释液稀释成系列浓度，浓度分别为0，0.2，0.5，2，5，12ng/mL，于2~8℃保存备用；

4）AngⅠ质控品的配制：在正常人血清中加入适量的AngⅠ纯品，配制低值质控品和高值质控品，其浓度的平均值分别为0.46ng/mL和10.35ng/mL；

5）配制发光液A液和B液

A液是含有0.7g/L鲁米诺和0.165g/L对碘酚的pH8.6的5mmol/LTris·HCl缓冲液；B液是浓度为0.675g/L的过氧化脲，用工艺用水配制；

6)配制20倍浓缩洗液

20倍浓缩洗液的配方如下：75.5g/L Tris，120g/L NaCl，5mL/L Tween-20，1g/LProclin300；

7）组装

将上述试剂组装成盒，储存于2～8℃；

8）对采用该方法制得的试剂盒进行物理检查，准确度、剂量-反应曲线的线性、精密度、特异性、灵敏度、质控品的测定值和稳定性进行测定。

8.根据权利要求7所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述的包被板为包被有AngⅠ抗体的96孔或48孔白色微孔板。