[发明专利]以PAMAM为间隔臂的仿生物特异性免疫吸附材料及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种以PAMAM为间隔臂的仿生物特异性免疫吸附材料，其特征在于具有如下Sep-PAMAM-AA的化学结构：

其中，Sep代表琼脂糖凝胶；AA代表氨基酸；n=0,1,2或3；PAMAM为聚酰胺-胺型树枝状高分子，所述氨基酸为L-组氨酸、苯丙氨酸或色氨酸。

2.权利要求1所述的以PAMAM为间隔臂的仿生物特异性免疫吸附材料的制备方法，其特征在于包括如下步骤和工艺条件：

（a）叠氮化琼脂糖凝胶的制备

向环氧化琼脂糖中加入叠氮化钠的水溶液，每克环氧化琼脂糖中加入叠氮化钠3～15mmol，20～60°C反应6～60h后，洗涤抽干得产物；

（b）PAMAM树枝状聚合物的合成

在温度为－10～10°C条件下，向丙烯酸甲酯的甲醇溶液中滴加炔丙胺，丙烯酸甲酯与炔丙胺的摩尔比为5～15∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～50°C反应12～50h，将反应产物进行减压蒸馏，得G 0.5 PAMAM；－10～10°C下，向乙二胺的甲醇溶液中滴加G 0.5PAMAM，乙二胺与G 0.5 PAMAM的摩尔比为10～30∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～50°C反应12～50h，将反应产物进行减压蒸馏得第一代产物G 1.0 PAMAM；

在温度为－10～10°C条件下，向丙烯酸甲酯的甲醇溶液中滴加G 1.0 PAMAM，丙烯酸甲酯与G 1.0 PAMAM的摩尔比为10～30∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～60°C反应15～60h，将反应产物进行减压蒸馏，得G 1.5 PAMAM；－10～10°C下，向乙二胺的甲醇溶液中滴加G 1.5 PAMAM，乙二胺与G 1.5 PAMAM的摩尔比为30～50∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～60°C反应15～60h，将反应产物进行减压蒸馏得第二代产物G 2.0 PAMAM；

在温度为－10～10°C条件下，向丙烯酸甲酯的甲醇溶液中滴加G 2.0 PAMAM，丙烯酸甲酯与G 2.0 PAMAM的摩尔比为30～50∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～70°C反应18～66h，将反应产物进行减压蒸馏，得G 2.5 PAMAM；－10～10°C下，向乙二胺的甲醇溶液中滴加G 2.5 PAMAM，乙二胺与G 2.5 PAMAM的摩尔比为70～90∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～70°C反应18～66h，将反应产物进行减压蒸馏得第三代产物G 3.0 PAMAM；

在温度为－10～10°C条件下，向丙烯酸甲酯的甲醇溶液中滴加G 3.0 PAMAM，丙烯酸甲酯与G 3.0 PAMAM的摩尔比为70～90∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～80°C反应24～72h，将反应产物进行减压蒸馏，得G 3.5 PAMAM；－10～10°C下，向乙二胺的甲醇溶液中滴加G 3.5 PAMAM，乙二胺与G 3.5 PAMAM的摩尔比为150～170∶1，保温反应0.5～3h后，升温至20～80°C反应24～72h，将反应产物进行减压蒸馏得第四代产物G 4.0 PAMAM；

（c）氨基酸甲酯盐酸盐的制备

将氨基酸置于甲醇溶液中，加入三甲基氯硅烷，所述三甲基氯硅烷与氨基酸的摩尔比为1～3∶1，回流至溶液澄清后旋蒸干燥；所述氨基酸为L-组氨酸、苯丙氨酸或色氨酸；

（d）氨基酸修饰的PAMAM的制备

将氨基酸甲酯盐酸盐溶于水中，并加入三乙胺及第一~第四代PAMAM产物中任意一种的水溶液，氨基酸甲酯盐酸盐、三乙胺与第一~第四代PAMAM产物的摩尔比为1～10∶1～10∶1；磁力搅拌下20～90°C反应24～96h，透析并冷冻干燥得氨基酸修饰的PAMAM产物，表示为PAMAM-AA；所述氨基酸甲酯盐酸盐为组氨酸甲酯盐酸盐、苯丙氨酸甲酯盐酸盐或色氨酸甲酯盐酸盐；所述第一~第四代PAMAM产物为G 1.0 PAMAM、G 2.0PAMAM、G 3.0 PAMAM和G 4.0 PAMAM；

（e）点击法制备以PAMAM为间隔臂的免疫吸附材料

将氨基酸修饰的PAMAM产物溶于水后，加入叠氮化琼脂糖凝胶，每克叠氮化琼脂糖凝胶加入1～10mmol氨基酸修饰的PAMAM产物，然后依次加入五水硫酸铜和抗坏血酸钠作催化剂，五水硫酸铜、抗坏血酸钠与氨基酸修饰的PAMAM产物的摩尔比为0.01～0.05∶0.02～0.1∶1；并于20～90°C反应24～96h，洗涤抽干得目标产物Sep-PAMAM-AA。