[发明专利]皮寒药中化学成分的分离纯化方法

权利要求书

1.7，2′-二羟基-4′-甲基-异黄酮的分离纯化方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

（1）取皮寒药，加水提取，水提液浓缩后，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取层，回收溶剂后，得皮寒药乙酸乙酯部位；

（2）取皮寒药乙酸乙酯部位，上硅胶柱，采用梯度洗脱方式，用二氯甲烷-甲醇=1:0V/V洗脱除杂后，再用二氯甲烷-甲醇=20:1V/V洗脱，收集洗脱液48份，每份均为1/4柱体积，即得A1-48号流分；

（3）合并A1-35号流分，浓缩后，上硅胶柱，用石油醚-丙酮=6：1V/V洗脱，收集洗脱液，再经葡聚糖柱层析，甲醇冲洗，共收集洗脱液25份，每份均为1/85柱体积，即得B1-25号流分；

（4）取B3-7号流分，回收溶剂后，以甲醇重结晶，得到7，2′-二羟基-4′-甲基-异黄酮。

2.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于：步骤（2）所述硅胶柱为柱层析硅胶柱，其中，硅胶为200-300目；

步骤（3）所述的硅胶柱为薄层硅胶G柱，葡聚糖柱为Sephadex G-25柱。

3.根据权利要求2所述的分离纯化方法，其特征在于：步骤（2）所述硅胶柱的径高比为1:7-9；

步骤（3）所述的硅胶柱的径高比为1:13-15，葡聚糖柱的径高比为1：28-32。

4.高丽槐素的分离纯化方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

取权利要求1制备的B1-25号流分，合并B10-21号流分，回收溶剂后，以甲醇重结晶，得到高丽槐素。

5.芒柄花素的分离纯化方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

取权利要求1制备的A1-48号流分，合并A36-41号流分，浓缩后，上硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇=20：1V/V洗脱除杂后，再用二氯甲烷-甲醇=16：1V/V进行洗脱，收集洗脱液，回收溶剂、结晶后过滤，滤得固体物经乙酸乙酯纯化，得到芒柄花素。

6.根据权利要求5所述的芒柄花素的分离纯化方法，其特征在于：所述硅胶柱为薄层硅胶G柱，其径高比为1:15-18。

7.芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的分离纯化方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

A、取皮寒药，加水提取，水提液浓缩后，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取层，回收溶剂后，得皮寒药乙酸乙酯部位；

B、取皮寒药乙酸乙酯部位，上硅胶柱，采用梯度洗脱方式，先用二氯甲烷-甲醇=1:0V/V洗脱除杂后，先用12倍柱体积的二氯甲烷-甲醇=20:1V/V洗脱，再用二氯甲烷-甲醇=15:1V/V洗脱，收集二氯甲烷-甲醇=15:1的洗脱液62份，每份均为1/4柱体积，即得C1-62号流分；

C、取C14-31号流分，浓缩后，上硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇12：1V/V洗脱除杂后，再用10：1V/V进行洗脱，收集洗脱液，过滤，滤液经葡聚糖柱层析，甲醇冲洗，收集甲醇洗脱液，回收溶剂后，甲醇重结晶，得到芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

8.根据权利要求7所述的芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的分离纯化方法，其特征在于：步骤B所述硅胶柱为柱层析硅胶柱，径高比为1:7-9，其中，硅胶为200-300目；

步骤C所述的硅胶柱为薄层硅胶G柱，径高比为1:12-14；葡聚糖柱为Sephadex G-25柱，径高比为1：22-24。

9.腺苷的分离纯化方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

①、取皮寒药，加水提取，水提液浓缩后，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取层，回收溶剂后，得皮寒药乙酸乙酯部位；

②、取皮寒药乙酸乙酯部位，上硅胶柱，采用梯度洗脱方式，用二氯甲烷-甲醇=1:0V/V洗脱除杂后，先用12倍柱体积的二氯甲烷-甲醇=20:1V/V洗脱，再用二氯甲烷-甲醇=15:1V/V洗脱，收集二氯甲烷-甲醇=15:1的洗脱液62份，每份均为1/4柱体积，即得C1-62号流分；再用二氯甲烷-甲醇=7:1V/V洗脱，收集洗脱液10份，每份均为1/4柱体积，即得D1-10号流分；

③、合并C53-62号流分、D1-10号流分，浓缩后，上硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇=10：1V/V洗脱，收集洗脱液，回收溶剂后，经乙酸乙酯重结晶，得到腺苷。

10.根据权利要求9所述的腺苷的分离纯化方法，其特征在于：步骤②所述硅胶柱为柱层析硅胶柱，径高比为1:7-9，其中，硅胶为200-300目；

步骤③所述硅胶柱为薄层硅胶G柱，径高比为1：12-14。