[发明专利]一种依诺肝素钠酶解方法

权利要求书

1.一种依诺肝素钠酶解方法，其特征在于向依诺肝素钠溶液中加入乙酸钠/钙溶液和混合酶溶液，在温度为29～31℃下酶解66～72小时；其中所述乙酸钠/钙溶液的pH值为7，所述混合酶中各酶的酶活比例为肝素酶I∶肝素酶II∶肝素酶III＝0.95～1.05∶1∶0.45～0.55。

2.根据权利要求1所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于所述混合酶中各酶的酶活比例为肝素酶I∶肝素酶II∶肝素酶III＝1∶1∶0.5。

3.根据权利要求1所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于所述依诺肝素钠溶液的浓度为15～25mg/ml；所述乙酸钠/钙溶液的体积是依诺肝素钠溶液体积的3～4倍。

4.根据权利要求1所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于所述混合酶溶液由肝素酶I、肝素酶II和肝素酶III溶解于磷酸缓冲溶液中制成，或者肝素酶I溶液、肝素酶II溶液和肝素酶III先分别溶解于磷酸缓冲溶液中，再混合后制成；所述混合酶溶液中各酶的浓度为0.09～0.40IU/ml。

5.根据权利要求1或4所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于所述混合酶溶液的体积是依诺肝素钠溶液体积的4.5～5.5倍。

6.根据权利要求4所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于所述磷酸缓冲溶液的配制方法为：将磷酸二氢钾和牛血清白蛋白一同溶解于水中后，调节pH值至7.0，加水稀释后用滤膜过滤；所述磷酸二氢钾和牛血清白蛋白的质量比为6.7～7∶1；磷酸缓冲溶液中磷酸二氢钾的浓度为1.3mg/ml～1.4mg/ml；所述滤膜的孔径在0.45μm以下。

7.根据权利要求6所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于所述磷酸二氢钾和牛血清白蛋白的质量比为6.8∶1；磷酸缓冲溶液中磷酸二氢钾的浓度为1.36mg/ml；滤膜孔径为0.45μm。

8.根据权利要求1或3所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于所述乙酸钠/钙溶液的配制方法为：将牛血清白蛋白和乙酸钙溶解于水中，加入冰醋酸后用氢氧化钠调节pH值为7.0，加水稀释后用滤膜过滤；牛血清白蛋白与乙酸钙的质量比为1∶3.0～3.4，牛血清白蛋白与冰醋酸的质量体积比为1∶55～60mg/μL；乙酸钠/钙溶液中乙酸钙的浓度为0.30～0.34mg/ml；滤膜孔径在0.45μm以下。

9.根据权利要求8所述的依诺肝素钠酶解方法，其特征在于牛血清白蛋白与乙酸钙的质量比为1∶3.2，牛血清白蛋白与冰醋酸的质量体积比为1∶58mg/μL，乙酸钠/钙溶液中乙酸钙的浓度为0.32mg/ml；滤膜孔径为0.45μm。