[发明专利]有机胂类分子印迹整体柱的制备及应用

说明书

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体说是一种有机胂类分子印迹整体柱的制备及其在动物性食品中有机胂类兽药残留分析中的应用。

背景技术

有机胂类是一类被广泛使用的抗菌促生长饲料添加药物，由于其在提高生产性能方面的良好作用，已成为目前世界范围内使用量和需求量最大的饲料添加药物之一。在20世纪40年代美国弗莱明大药厂最先研制成功有机胂类药物对氨基苯胂酸，我国于1993年批准该药用于猪和鸡的使用，于1996年批准洛克沙胂的使用。此外，该类药物对组织滴虫、变形虫、毛滴虫、小袋虫、附红细胞体、球虫病、梨形虫病和锥虫病等多种寄生虫也有较好的防治效果。

有机胂类作为一种被广泛应用的抗菌促生长饲料添加剂在畜禽养殖生产中发挥了巨大的作用，同时其在动物性食品中的毒性、残留以及对环境的污染等问题也备受关注。有机胂类药物的毒性虽较无机砷弱，但大剂量应用仍可导致严重的后果。饲料中添加如达到推荐剂量的10倍时，动物几天便会中毒，常出现增重缓慢、虚弱、皮炎、失明、运动失调和轻瘫。大量使用有机胂类制剂，不仅可导致其在畜产品内残留，还可转化为无机砷导致环境污染，危害人体健康。按目前有机胂类添加剂的使用情况，其经畜禽排泄物进人环境中的砷量是十分惊人的。据估测，一个万头猪场仅按商品肉猪日粮中对氨基苯胂酸100mg/kg的添加量，则每年需用360kg对氨基苯胂酸，将向周环境边排放约124kg砷，该万头猪场若连续使用有机胂类添加剂5-8年，即可向周边排放1吨砷。若将这些排泄物施用在133.3km²的土地上，8年则使土壤的含砷量人为增加4.6mg/kg，同时，地下水的含砷量也会增加。

国际癌症研究机构（IARC，1980）公布砷为致癌因子，在接触和摄取一定量砷的人群中，发现其肺癌、皮肤癌、支气管癌及其他癌症的发病率增加，且有报道称发病率随砷的摄入量及年龄的增长成线性关系。而有机胂类化合物在人和动物体内可转化为一定量的无机砷和多种不同的有机化合物。有机胂的大量应用无疑可导致无机砷的生物富集，使土壤和农作物中砷的含量超标，进而危害人体健康。

目前，对动物源性食品中有机胂类残留常用的仪器分析方法主要有紫外分光光度法、气相色谱法、气相色谱-质谱法联用、高效液相色谱法、离子对色谱法、微柱高效液相色谱耦合电喷雾质谱、液阱波导连续进样原子吸收分光光度法、毛细管电泳耦合质谱法等。除紫外分光光度法外，其余检测方法的灵敏度、特异性和检测限均较理想，但检测方法和样品的前处理过程较为繁琐和复杂，且费时费力，影响因素较多。因此，如何从复杂基质中对含有机胂类药物残留的样品进行前处理就成了该类药物残留检测的关键步骤。固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）是近年来迅速发展起来的专门用于样品纯化和浓缩的一项技术，被广泛应用于多种复杂样品的前处理过程中。与液-液萃取相比，SPE可以更有效地将分析物与干扰物分离，减少样品前处理过程，使操作更加简便、高效、省时、省力。SPE处理的效果很大程度上依赖于其填料的种类，已有的填料包括活性炭、硅胶和氧化铝等，这些传统填料中吸附剂与目标分子之间主要依靠一些非特异性的分子间作用力而进行相关物质的吸附。此外，基于生物性抗体的SPE柱虽然能够特异性地进行目标分子的识别，但抗体的制备过程复杂，成本高，制备周期长且对环境条件的耐受力较差。

分子印迹技术作为一种能够获得在空间和结合位点上与某种分子完全匹配的聚合物的制备技术，具有构效的预定性、识别的特异性和广泛的实用性。与生物性的抗体相比具有稳定性和重复性好、性能稳定、耐极端环境能力强、制备过程简便、成本低廉等特点。利用分子印迹技术所得的聚合物被广泛用作SPE和色谱柱的填料。随着分子印迹技术的飞速发展，将分子印迹和色谱制备技术结合于一体的分子印迹整体柱也逐渐成为了研究的热点。整体柱通过有机或无机聚合方法在柱内进行原位聚合制备固定相，可大大减少装填不均一性所产生的分离性能和参数的差异。将分子印迹整体柱与先进的仪器分析方法相结合可以方便、快捷、准确地实现食品中低丰度残留物的检测，这对于提高我国的检测水平，促进食品安全和经济贸易平衡都具有十分重要的意义。

本发明采用原位聚合法制备对有机胂类药物具有良好识别性能的分子印迹整体柱，所制备的SPE柱可以用于动物性食品中该类药物的仿生识别、选择性吸附和富集，进而满足复杂基质中痕量残留物检测的需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种有机胂类兽药残留的分子印迹整体柱，以弥补现有检测技术和普通SPE柱的不足。 

有机胂类分子印迹整体柱的制备及应用，其具体步骤如下：