[发明专利]用于生产高亲和力抗体的方式和方法

权利要求书

1.一种用于产生对目标抗原特异性的高亲和力抗体的方法，所述方法包括：

a)选择能够产生对所述目标抗原特异性的抗体的B细胞，或者

选择B细胞，该B细胞能够分化成能产生对所述目标抗原特异性的抗体的B细胞；

b)诱导、增强和/或保持所述B细胞中的BCL6的表达；

c)诱导、增强和/或保持所述B细胞中的抗凋亡核酸的表达；

d)允许所述B细胞扩张成第一单克隆B细胞群；

e)对来自所述第一单克隆B细胞群的B细胞进行抗原染色和BCR染色，并且选择B细胞，该B细胞具有指示高抗原亲和力的抗原染色和BCR染色的组合；

f)允许所选择的B细胞扩张成为第二B细胞群；

g)测量由所述第二B细胞群的至少一个B细胞所产生的抗体的抗原关联率和分离率；以及

h)选择对所述目标抗原的亲和力比所述第一单克隆B细胞群所产生的抗体对所述目标抗原的平均亲和力高的抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，在步骤f)之后进一步包括：重复至少一次步骤e)和步骤f)。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤g)中的所述抗原关联率和分离率使用表面等离子体共振来测量。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，将所述至少一个B细胞培养达至少四个星期。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在步骤a)中所选择的B细胞是记忆B细胞。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，在步骤a)中所选择的B细胞是人记忆B细胞。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述抗凋亡核酸包括编码BCL2家族的抗凋亡分子，或所述抗凋亡分子的功能部分的基因。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述抗凋亡分子为Bcl-xL或Mcl-1。

9.根据权利要求1或2所述的方法，进一步包括：向所述B细胞提供生长因子。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述生长因子为IL21和CD40L。

11.根据权利要求1或2所述的方法，进一步包括：直接或间接控制在步骤a)中所选择的B细胞中的Blimp-1表达产物的量。

12.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在步骤a)中所选择的B细胞源自预先已经暴露于所述目标抗原的个体。

13.根据权利要求1或2所述的方法，进一步包括：在第二细胞中表达来自所述至少一个B细胞的编码Ig重链和/或Ig轻链的基因。

14.一种用于产生对目标抗原特异性的低亲和力抗体的方法，所述方法包括：

a)选择能够产生对所述目标抗原特异性的抗体的B细胞，或者

选择B细胞，该B细胞能够分化成能产生对所述目标抗原特异性的抗体的B细胞；

b)诱导、增强和/或保持所述B细胞中的BCL6的表达；

c)诱导、增强和/或保持所述B细胞中的抗凋亡核酸的表达；

d)允许所述B细胞扩张成第一单克隆B细胞群；

e)对来自所述第一单克隆B细胞群的B细胞进行抗原染色和BCR染色，并且选择B细胞，该B细胞具有指示低抗原亲和力的抗原染色和BCR染色组合的B细胞；

f)允许所选择的B细胞扩张成为第二B细胞群；

g)测量由所述第二B细胞群的至少一个B细胞所产生的抗体的抗原关联率和分离率；以及

h)选择对所述目标抗原的亲和力比所述第一单克隆B细胞群所产生的抗体对所述目标抗原的平均亲和力低的抗体。