[发明专利]β-淀粉样肽的聚合物补体

说明书

技术领域

本申请涉及β-淀粉样肽(Aβ)的聚合物补体的制备以及用途，其用于检测液体样品中的可溶或者聚合Aβ，或用于治疗具有神经退行性疾病的患者。

背景技术

阿耳茨海默氏病(AD)是最普遍的人类晚年痴呆原因，并在发达国家中导致死亡的排名第四的疾病。据认为淀粉样斑块的脑沉积对疾病起了主要作用。因此，在显微镜下，AD的特征为显著的神经元和他们的突触退化，以及在大脑新皮层和海马体内存在大量的衰老斑和神经肌原纤维缠结。斑是由淀粉样蛋白沉积组成，主要包含39-42残基肽，称为：β-淀粉(Aβ)(图1)的聚合。所述肽从跨膜蛋白淀粉样前体蛋白(APP)的蛋白水解断裂而来，包括两种酶，β-分泌酶(在Aβ的N-端)和g-分泌酶(在Aβ的C-端)。

所得的肽展示了异构终端，在疏水的C-端处不一样(图2)。更大，更疏水的肽类(42-43残基)更有效力聚集，并使得斑块形成和神经元死亡。使用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法，有报道指出健康或非痴呆个体的脑脊髓液的两个Aβ42平均值，该两个平均值相差2.5-3的因子(～1650和～650pg/mL)。所有的研究报道指出AD患者的Aβ42水平为对照组的大约一半，尽管通过检测可溶的Aβ42/Aβ40发现具有更好的相关性(K.Blennow，J.Int.Med.，2004，256，224)。除了中枢神经系统(CNS)，在众多周围组织中发现了淀粉样肽。血浆中的Aβ42浓度要比在CSF中的Aβ42浓度要低约十倍。最近报告指出血浆中的Aβ水平和脑部，以及在斑块中的Aβ水平之间的相关性。

使用明显的治疗方法来防止，减少或逆转这些斑块的形成。因此，大多数的药物研制效果都集中在Aβ上，来抑制造成斑块形成(β-和-γ分泌酶)的酶，来隔绝肽的可溶性部分，或打断存在的聚合物。尽管通过第一和第二方法研制的候选药物处于后期临床试验，目前所采取的所有这些方法碰到预料不到的问题，并出现了单一种药可治疗疾病的疑惑。通过隔绝斑块的可溶部分(ADDL＝淀粉样蛋白衍生的可扩散配体)，从脑部清除形成的Aβ是最有前途的方法之一。同样，从血液循环中去除Aβ可导致患者脑部减少的斑块负荷，以及积极的效果。治疗抗体是一种在这方面有希望的方法。近年来，研制了许多Aβ的单克隆抗体，这些抗体可随着时间减少斑块-沉积转基因小鼠模型的脑部的淀粉样斑块的压力(DeMattos，R.B.，et al.2001.Peripheral anti-A beta antibody alters CNS and plasma A beta clearanceand decreasesbrain A beta burdeninamousemodel of Alzheimer′s disease.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.98：8850-8855)。然而，大多数这种抗体将Aβ的N-端作为目标，导致所有Aβ-形式的总体减少。这种方法因此不能特定地清除最致病的形式Aβ1-42。所有Aβ亚型的不加区别的去除会干扰更多Aβ可溶形式具有的二次有益作用。因此，允许对致病的Aβ1-42形式进行选择性隔绝的治疗提供了治疗效果。这意味着可以抑制原纤维的形成(淀粉样蛋白聚集以形成斑块)，并限制疾病的发展。显露了高比表面积的纳米颗粒的使用在这方面证实了希望(C.Cabaleiro-Lago，F. Quinlan-Pluck，I.Lynch，K.A.Dawson，S.Linse ACS Chem.Neurosci.(2010)，1，279-287.)。通过使用尺寸范围在57和180nm之间的氨基改性聚苯乙烯纳米颗粒，可观察到原纤维形成在更高的颗粒浓度下得到抑制。可以合理地假设抑制的开始可通过增加纳米颗粒对Aβ42蛋白亲合力和选择性来降低。