[发明专利]新的细胞外分泌型核酸酶有效
| 申请号: | 201180044912.3 | 申请日: | 2011-09-15 |
| 公开(公告)号: | CN103108950A | 公开(公告)日: | 2013-05-15 |
| 发明(设计)人: | 森梢;大田优佳莉;秦田勇二;中村信之;宫崎征行 | 申请(专利权)人: | 独立行政法人海洋研究开发机构 |
| 主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N1/20;C12Q1/42;C12Q1/68;C12N15/09;C12R1/465 |
| 代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 王海川;穆德骏 |
| 地址: | 日本,*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 细胞 外分泌 核酸酶 | ||
1.一种链霉菌属细菌来源的细胞外分泌型核酸酶,其以双链DNA、单链DNA和RNA为底物,并且纯化后在含有1mM MgCl2和1mM CaCl2、pH为8.5的20mM Tris/HCl中在37℃下供于双链DNA30分钟时的比活性与ベンゾナーゼ(注册商标)的比活性为同等程度或高于ベンゾナーゼ的比活性。
2.如权利要求1所述的核酸酶,其中,利用SDS-PAGE法测定的分子量为17000~21000。
3.如权利要求1所述的核酸酶,其中,需要Mg2+或Mn2+作为二价金属离子。
4.如权利要求1所述的核酸酶,其中,链霉菌属细菌是保藏编号为FERM P-21987的链霉菌(Streptomyces sp.)MBE174。
5.一种核酸酶,其中,包含:
(1)序列表的序列号1中记载的氨基酸序列、
(2)序列表的序列号1中记载的氨基酸序列中缺失、取代或添加一个至数个氨基酸后得到的氨基酸序列、或
(3)与序列表的序列号1中记载的氨基酸序列具有90%以上的同源性的氨基酸序列。
6.一种链霉菌属细菌来源的细胞外分泌型核酸酶,其以双链DNA和单链DNA为底物,并且在100mM Na+存在下的比活性为未添加Na+时的比活性的60%以上。
7.如权利要求6所述的核酸酶,其中,利用SDS-PAGE法测定的分子量为约66500。
8.如权利要求6所述的核酸酶,其中,需要Mg2+作为二价金属离子。
9.如权利要求6所述的核酸酶,其中,链霉菌属细菌是保藏编号为FERM P-21987的链霉菌(Streptomyces sp.)MBE174。
10.一种核酸酶,其中,包含:
(a)序列表的序列号2中记载的氨基酸序列、
(b)序列表的序列号2中记载的氨基酸序列中缺失、取代或添加一个至数个氨基酸后得到的氨基酸序列、或
(c)与序列表的序列号2中记载的氨基酸序列具有85%以上的同源性的氨基酸序列。
11.一种粗酶,其中,含有权利要求1~5中任一项所述的核酸酶和/或权利要求6~10中任一项所述的核酸酶作为核酸酶活性成分。
12.一种细胞外分泌型核酸酶的制造方法,其中,包括对保藏编号为FERM P-21987的链霉菌(Streptomyces sp.)MBE174进行培养而得到至少一种细胞外分泌型核酸酶的步骤。
13.一种细胞外分泌型核酸酶或其粗酶,其通过权利要求12所述的制造方法得到。
14.链霉菌(Streptomyces sp.)MBE174,其保藏编号为FERMP-21987。
15.一种分解核酸的方法,其中,包括将权利要求1~5中任一项所述的核酸酶和/或权利要求6~10中任一项所述的核酸酶供于含有核酸的试样而使所述核酸分解的步骤。
16.如权利要求15所述的方法,其中,所述核酸为DNA。
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