[发明专利]具有增强的3’-错配辨别力的DNA聚合酶

权利要求书

1.DNA聚合酶，与对照DNA聚合酶相比，所述DNA聚合酶具有增强的3'-错配辨别力活性，其中对应于SEQ ID NO:1的488位的所述DNA聚合酶的氨基酸是除S以外的任何氨基酸，其中除了对应于SEQ ID NO:1的488位的所述对照DNA聚合酶的氨基酸是S，所述对照DNA聚合酶具有与所述DNA聚合酶相同的氨基酸序列。

2.权利要求1的DNA聚合酶，在聚合酶结构域中包含基序，所述基序包含

A-G-X₁-X₂-F-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-Q-X₉-X₁₀-X₁₁-X₁₂-L-X₁₃-X₁₄-X₁₅-L，其中：

X₁是H、E或Q；

X₂是P、T或E；

X₃是N或H；

X₄是L或I；

X₅是N或R；

X₆是除S以外的任何氨基酸；

X₇是R、P、或S；

X₈是D、K或T；

X₉是L或V；

X₁₀是E、S、A或G；

X₁₁是R、N、Y、T或V；

X₁₂是V或I；

X₁₃是F或Y；

X₁₄是D或E；以及

X₁₅是E或K (SEQ ID NO:8)。

3.权利要求1的DNA聚合酶，在聚合酶结构域中包含基序，所述基序包含

A-G-X₁-P-F-N-X₄-N-X₆-X₇-X₈-Q-X₉-X₁₀-X₁₁-X₁₂-L-F-X₁₄-X₁₅-L，其中：

X₁是H或E；

X₄是L或I；

X₆是除S以外的任何氨基酸；

X₇是R或P；

X₈是D或K；

X₉是L或V；

X₁₀是E或S；

X₁₁是R或N；

X₁₂是V或I；

X₁₄是D或E；以及

X₁₅是E或K (SEQ ID NO:9)。

4.权利要求1的DNA聚合酶，在聚合酶结构域中包含基序，所述基序包含

A-G-H-P-F-N-L-N-X₆-R-D-Q-L-E-R-V-L-F-D-E-L，其中：

X₆是除S以外的任何氨基酸(SEQ ID NO:10)。

5.权利要求4的DNA聚合酶，其中X₆是G、A、D、F、K、C、T或Y (SEQ ID NO:11)。

6.权利要求1-5中任一项的DNA聚合酶，其中对应于SEQ ID NO:1的580位的氨基酸是除D或E以外的任何氨基酸。

7.权利要求1-6中任一项的DNA聚合酶，其中对应于SEQ ID NO:1的580位的氨基酸选自L、G、T、Q、A、S、N、R和K。

8.权利要求1-7中任一项的DNA聚合酶，其中所述DNA聚合酶包含与SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、36、37、38、39、40或41至少80％，优选至少90％，更优选至少95％序列相同的氨基酸序列。