[发明专利]使用血液中的循环黑素瘤细胞为黑素瘤患者预测临床结果的方法

权利要求书

1. 一种预测具有转移性黑素瘤的患者的总体生存的方法，包括：

(a) 从具有转移性黑素瘤的患者获得7.5ml血样，所述样品包含怀疑含有循环黑素瘤细胞的混合细胞群；

(b) 富集所述样品的级分，所述级分包含所述循环黑素瘤细胞；

(c) 确认所述稀有细胞的结构完整性为未受损的；

(d) 分析所述未受损的稀有细胞；其中所述分析关联疾病进展；

(e) 评估所述血样中的循环黑素瘤细胞的数目

其中如果所述数目大于或等于2，则预示所述患者的总体生存为低，并且

其中如果所述循环黑素瘤细胞的数目小于2，则预示所述患者的总体生存为高。

2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述级分通过免疫磁性富集获得，所述免疫磁性富集使用外部施加的磁场来分离与特异性地结合所述黑素瘤细胞的生物特异性配体偶联的顺磁性颗粒以基本上排除其它群体。

3. 根据权利要求2所述的方法，其中所述生物特异性配体是黑素瘤细胞粘附分子CD146。

4. 根据权利要求1所述的方法，其中所述结构完整性通过选自免疫细胞化学法、FISH法、流式细胞术、图像细胞术、以及它们的组合的方法确定。

5. 根据权利要求1所述的方法，其中所述结构完整性通过核酸染料、高分子量黑素瘤相关抗原的特异性单克隆抗体确定。

6. 根据权利要求5所述的方法，其中所述结构完整性通过使用白细胞和内皮特异性抗体排除共富集的白细胞和循环内皮细胞被进一步确认。

7. 根据权利要求6所述的方法，其中所述特异性抗体是CD45和CD34。

8. 根据权利要求5所述的方法，还包含CD45和CD34以排除共富集的白细胞和循环内皮细胞。

9. 根据权利要求1所述的方法，其中添加FITC标记的抗Ki67以确定所述循环内处于活跃细胞周期的CMC的比例。

10. 根据权利要求1所述的方法，其中低总体生存为不超过两个月。

11. 根据权利要求1所述的方法，其中高总体生存为十二个月。