[发明专利]用于改善脂肪酸含量而开发的铜绿假单孢菌菌株及制备方法

权利要求书

1.一种脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

利用含有编码化脓性链球菌来源的酰基(酰基载体蛋白质)硫酯酶的核苷酸的表达载体进行转基因。

2.一种脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

利用含有编码铜绿假单孢菌的乙酰辅酶A羧酶羧基转移酶阿尔法亚基的核苷酸与编码化脓性链球菌的酰基(酰基载体蛋白质)硫酯酶的核苷酸的表达载体进行转基因。

3.一种脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

利用含有编码铜绿假单孢菌的丙二酰-辅酶A-[酰基载体蛋白质]转酰酶的核苷酸与编码化脓性链球菌的酰基(酰基载体蛋白质)硫酯酶的核苷酸的表达载体进行转基因。

4.一种脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

利用含有编码铜绿假单孢菌的乙酰辅酶A羧酶羧基转移酶阿尔法亚基的核苷酸及编码丙二酰-辅酶A-[酰基载体蛋白质]转酰酶的核苷酸，含有编码化脓性链球菌的酰基(酰基载体蛋白质)硫酯酶的核苷酸的表达载体进行转基因。

5.根据权利要求1到4的任意一项所述的脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

上述表达载体是具有图2所记载的基因地图的大肠杆菌-绿脓杆菌穿梭载体pUCP19。

6.根据权利要求1到4的任意一项所述的脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

编码上述酰基-酰基载体蛋白质硫酯酶的核苷酸具有记载为序列编号：6的盐基顺序。

7.根据权利要求2或4所述的脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

上述编码乙酰辅酶A羧酶羧基转移酶阿尔法亚基的核苷酸具有记载为序列编号：2的盐基顺序。

8.根据权利要求3或4所述的脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

上述编码丙二酰-辅酶A-[酰基载体蛋白质]转酰酶的核苷酸具有记载为序列编号：4的盐基顺序。

9.根据权利要求1到4的任意一项所述的脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌，其特征在于，

上述铜绿假单孢菌是铜绿假单孢菌PA14。

10.一种脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌的制备方法，包括下列步骤：

i)把编码化脓性链球菌的酰基(酰基载体蛋白质)硫酯酶的核苷酸插入表达载体的步骤；及

ii)利用上述步骤i)的表达载体让铜绿假单孢菌转基因的步骤.

11.一种脂肪酸过量表达用铜绿假单孢菌的制备方法，包括下列步骤：

i)把编码乙酰辅酶A羧酶羧基转移酶阿尔法亚基的核苷酸或编码丙二酰-辅酶A-[酰基载体蛋白质]转酰酶的核苷酸中的一个或两个全部、及编码化脓性链球菌的酰基(酰基载体蛋白质)硫酯酶的核苷酸插入表达载体的步骤；及

ii)利用上述步骤i)的表达载体让铜绿假单孢菌转基因的步骤。

12.一种脂肪酸生产方法，包括下列步骤：

i)培养权利要求1到4的任意一项的铜绿假单孢菌后生物合成脂肪酸的步骤；及

ii)获取上述步骤i)中生物合成的脂肪酸的步骤。