[发明专利]基因开关组合物及使用方法

权利要求书

1.用于调控植物中或种子中包含的植物细胞中的表达的方法，所述方法包括：

(a)提供包含磺酰脲类调控的基因开关的植物细胞，所述基因开关控制受关注的多核苷酸的表达，其中所述植物细胞为耐磺酰脲类植物细胞；以及；

(b)提供调控所述基因开关的磺酰脲类化合物，其中所述磺酰脲类化合物通过叶施用、灌根施用、出苗前施用、出苗后施用、或种子处理施用来提供。

2.权利要求1的方法，其中所述受关注的多核苷酸的表达改变所述植物细胞的表型。

3.权利要求1或2的方法，其中所述受关注的多核苷酸的表达改变所述植物细胞的基因型。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中提供所述磺酰脲类化合物激活所述受关注的多核苷酸的表达。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述植物细胞来自单子叶植物或双子叶植物。

6.权利要求5的方法，其中所述植物细胞来自玉米、稻、高粱、甘蔗、大麦、燕麦、小麦、草坪草、大豆、低芥酸菜籽、棉、烟草、向日葵、红花、或苜蓿。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述磺酰脲类调控的基因开关包含可操作地连接至受关注的多核苷酸的阻抑型启动子，其中所述阻抑型启动子包含tet操纵子。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述磺酰脲类调控的基因开关包含选自SEQ ID NO：855、856、857、858、859和860的阻抑型启动子、或与SEQ ID NO：855、856、857、858、859、860或862具有至少95％的序列同一性的阻抑型启动子。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述磺酰脲类化合物包括嘧啶基磺酰脲类化合物、三嗪基磺酰脲类化合物、或噻唑基脲类化合物。

10.权利要求9的方法，其中所述磺酰脲类化合物包括氯磺隆、胺苯磺隆、噻吩磺隆、甲磺隆、甲嘧磺隆、苯磺隆、氯嘧磺隆、烟嘧磺隆、或砜嘧磺隆。

11.权利要求1-10中任一项的方法，其中所述受关注的多核苷酸编码特异性地结合至靶核酸序列的多肽。

12.权利要求11的方法，其中所述多肽为重组酶、整合酶、核酸酶、归巢内切核酸酶、或锌指核酸酶。

13.权利要求1-12中任一项的方法，其中所述磺酰脲类调控的基因开关包含磺酰脲类反应性阻遏物，所述磺酰脲类反应性阻遏物包含SEQID NO：3-419中任一种的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：3-419中的任一种具有至少85％的序列同一性的氨基酸序列。

14.磺酰脲类调控的基因开关，所述基因开关控制受关注的多核苷酸的表达，其中所述受关注的多核苷酸编码特异性地结合DNA序列的多肽，或编码切割DNA序列的多肽。

15.权利要求14的磺酰脲类调控的基因开关，其中所述编码的多肽为重组酶、整合酶、核酸酶、归巢内切核酸酶、或锌指核酸酶。

16.权利要求14或15的磺酰脲类调控的基因开关，其中所述磺酰脲类基因开关包含磺酰脲类反应性阻遏物，其中所述磺酰脲类反应性阻遏物可操作地连接至在所述植物中有活性的启动子，其中所述启动子为组成型启动子、组织优选的启动子、发育阶段优选的启动子、诱导型启动子、或阻抑型启动子。

17.权利要求16的磺酰脲类调控的基因开关，其中

(a)所述组成型启动子为MTH启动子、EF1a启动子、PIP启动子、泛素启动子、肌动蛋白启动子、或35S CaMV启动子；

(b)所述组织优选的启动子为分生组织优选的启动子、胚芽优选的启动子、叶优选的启动子、根优选的启动子、花药优选的启动子、花粉优选的启动子、或花优选的启动子；

(c)所述发育阶段优选的启动子为早期胚芽启动子、晚期胚芽启动子、发芽优选的启动子、或衰老优选的启动子；

(d)所述诱导型启动子为化学物质诱导型启动子、病原体诱导型启动子、热应激启动子、干旱胁迫启动子、光诱导型启动子、渗压剂诱导型启动子、或金属诱导型启动子；或者，

(e)所述阻抑型启动子为四环素阻抑型启动子、或乳糖阻抑型启动子。