[实用新型]缺铁性贫血相关血清铁浓度检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及分子生物学和医学领域，具体涉及检测缺铁性贫血相关血清铁浓度的试剂盒，通过同时检测与缺铁性贫血密切相关的跨膜丝氨酸蛋白酶（TMPRSS6）和转铁蛋白受体2（TfR2）的单核苷酸多态性位点基因型来评估个体缺铁性贫血症状程度。

背景技术

缺铁性贫血是体内铁的储存不能满足正常红细胞生成的需要而发生的贫血。是由于铁摄入量不足、吸收量减少、需要量增加、铁利用障碍或丢失过多所致。形态学表现为小细胞低色素性贫血。缺铁性贫血不是一种疾病，而是疾病的症状。

缺铁性贫血是最多的一种贫血，广泛地存在于世界各地，据世界卫生组织（WHO）调查报告，全世界约有10—30%的人群有不同程度的缺铁。男性发病率约10%，女性大于20%。亚洲发病率高于欧洲。发表在2008年4月13日的《自然—遗传学》（Nature Genetics）杂志网络版上，来自美国的研究人员报告说，一个名为TMPRSS6的基因发生变异后，会导致出现一种罕见疾病——“难治性缺铁性贫血症”。研究人员称，这一发现将为治疗常见的铁失调症提供新思路。

TMPRSS6是跨膜丝氨酸蛋白酶（TMPRSSs）中的亚家族中的其中一员。跨膜丝氨酸蛋白酶又名Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶（TTSPs）是一类定位于细胞膜上具有保守丝氨酸蛋白酶结构域的蛋白家族。

自1998年发现第一个跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS1（hep sin）（Leytus等，1998）以来，至今已在人、小鼠和老鼠中发现二十多个成员，仅人类就有十几种。TMPRSS表达具有明显组织特异性，TMPRSS6主要在胎儿和成人肝脏中表达（Velasco等，2002），而TMPRSS10主要存在于心脏（Yan等，1999），这种表达模式说明不同TMPRSS参与不同生理过程。TMPRSS家族成员在分子量上差别巨大，如人TMPRSS1包含417个氨基酸残基，而TMPRSS10由1042个氨基酸构成，两者相差1倍以上，但基本结构却高度相似，均含四部分，从N端到C端依次为短细胞质结构域、跨膜结构域、主干区和丝氨酸蛋白酶结构域，后两者位于胞外，不同成员区别主要集中于主干区。

根据主干区不同，TMPRSS可被进一步分为四个亚家族：HAT/DESC、hepsin/TMPRSS、matriptase和corin。HAT/DSEC亚家族包括TMPRSS11d（HAT）和TMPRSS11e（DESC1），它们结构最为简单，主干区仅由单一SEA（sea urchin sperm protein，enteropep tidase，agrin）结构域构成。Hepsin/TMPRSS亚家族包括TMPRSS1~5和TMPRSS13等，是包含种类最多的一个亚家族，主干区包含清道夫受体富含半胱氨酸（scavenger receptor cys-rich，SRCR）结构域和低密度脂蛋白A类受体（low density lipoprotein receptor class A，LDLa）结构域。matriptase亚家族包括TMPRSS14（matriptase-1）、TMPRSS6（matriptase-2）和TMPRSS7（matriptase-3），其主干区除含有SEA结构域外，还包含2个CUB（complement protein subcomponents Clr/Cls，urchin embryonic growth factor and bone morphogenetic protein 1）结构域及3到4个串联重复LDLa结构域。corin亚家族目前只发现一个成员TMPRSS10（corin），其结构最为复杂，主干区包含8个LDLa结构域，2个frizzled结构域和1个SRCR结构域。

TMPRSS6表达具有肝脏特异性，其基因突变可造成人难治性缺铁性贫血（iron-refractory iron deficiency anemia，RDA）的发生（Finberg等，2008），而TMPRSS6基因突变小鼠也具有严重缺铁和贫血表型，对贫血病人和突变小鼠单纯给予高铁饮食都无法完全改善贫血，这说明TMPRSS6基因突变破坏了机体在缺铁情况下的铁吸收，从而导致贫血。