[发明专利]用于组织液冻干的耐热保护剂、其制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及耐热冻干保护剂，具体为一种用于组织液冻干的耐热保护剂、其制备方法及其应用。

背景技术

  冻干保护剂可影响生物制品的质量、效价和稳定性，改变生物制品的生产工艺，并增大产品批次间的稳定性。耐热冻干保护剂有免疫活性但无药理活性，可在冻干和保存时维持疫苗的稳定性。耐热冻干保护剂及其制备方法是疫苗生产中的一项关键技术。

对于耐热保护剂在组织液保护中的应用，耐热保护剂中原辅材料的选择、配制、灭菌、保存和使用，对于耐热冻干保护剂的保护质量起着至关重要的作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种配制方法简单、成本低、具有良好保护性能的用于组织液冻干的耐热保护剂。

本发明的具体技术方案为： 用于组织液冻干的耐热保护剂，由以下成分组成：每1000ml体积中含蔗糖48～52g、胰蛋白胨 48～52g、海藻糖4～6g、最小必需培养基Medium 199  9～11g、酶解干酪素NZ-Amine AS  36～39g、明胶7～9g，其余为纯化水。

用于组织液冻干的耐热保护剂，优选由以下成分组成：每1000ml体积中含蔗糖50g、胰蛋白胨 50g、海藻糖5g、最小必需培养基Medium 199  10g、酶解干酪素NZ-Amine AS  37.5g、明胶8g，其余为纯化水。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供上述耐热保护剂的制备方法，其技术方案为：制备用于组织液冻干的耐热保护剂的方法，包括以下步骤：

（1）用80～90℃纯化水将明胶溶解后再依次加蔗糖、胰蛋白胨、海藻糖、最小必需培养基Medium 199 、酶解干酪素NZ-Amine AS 等成分；

（2）高压灭菌；

（3）2－8℃保存90天。

所述高压灭菌为在15磅压力下灭菌15分钟。

本发明用于组织液冻干的耐热保护剂在保护组织液中的应用，耐热保护剂与组织液按照1:1的体积比配制。

本发明的有益效果为：适用于鸡传染性法氏囊活疫苗、鸭瘟组织毒活疫苗、鸡传染性喉气管炎活疫苗；可常温保存；对组织液有良好的保护性能；配制方法简单、成本低。

具体实施方式

实施例1：

用于组织液冻干的耐热保护剂，由以下成分组成：每1000ml体积中含蔗糖50g、胰蛋白胨 50g、海藻糖5g、最小必需培养基Medium 199  10g、酶解干酪素NZ-Amine AS  37.5g、明胶8g，其余为纯化水。

制备用于组织液冻干的耐热保护剂的方法，包括以下步骤：

（1）用80～90℃纯化水将225明胶（购自北京拜尔迪生物公司）溶解后再依次加蔗糖、胰蛋白胨、海藻糖、最小必需培养基Medium 199（购自北京清大天一生物技术有限公司）、酶解干酪素NZ-Amine AS（购自北京拜尔迪生物公司）等成分；

（2）15磅压力下高压灭菌15分钟；

（3）2－8℃保存90天。

用于组织液冻干的耐热保护剂在保护组织液中的应用，耐热保护剂与组织液按照1:1的体积比配制。

实施例2：

用于组织液冻干的耐热保护剂，由以下成分组成：每1000ml体积中含蔗糖52g、胰蛋白胨 48g、海藻糖4g、最小必需培养基Medium 199  11g、酶解干酪素NZ-Amine AS  39g、明胶7g，其余为纯化水。

制备用于组织液冻干的耐热保护剂的方法，同实施例1。

用于组织液冻干的耐热保护剂在保护组织液中的应用，同实施例1。

实施例3：

用于组织液冻干的耐热保护剂，由以下成分组成：每1000ml体积中含蔗糖48g、胰蛋白胨 52g、海藻糖6g、最小必需培养基Medium 199  9g、酶解干酪素NZ-Amine AS 36g、明胶9g，其余为纯化水。

制备用于组织液冻干的耐热保护剂的方法，同实施例1。

用于组织液冻干的耐热保护剂在保护组织液中的应用，同实施例1。

试验例：保护效力试验。

1、试验材料：毒株：鸡传染性法氏囊活疫苗（B87株），购自中国兽医药品监察所；

2、试验疫苗：按照本发明方法配制耐热冻干保护剂，与组织液按照1:1的体积比配制，冻干处理后，得疫苗；