[发明专利]一个受体蛋白激酶基因及其表达载体和应用有效
| 申请号: | 201110428520.9 | 申请日: | 2011-12-20 |
| 公开(公告)号: | CN102586291A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
| 发明(设计)人: | 肖进;王秀娥;贾新平;王海燕;曹爱忠;邢莉萍;陈佩度;赵维萍;李明浩;陈炜;裴海岩;薛钊坤;王加 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
| 主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N9/12;C12N15/63;A01H5/00 |
| 代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛 |
| 地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一个 受体 蛋白激酶 基因 及其 表达 载体 应用 | ||
技术领域
本发明属于基因工程领域,公开了一个受体蛋白激酶基因及其表达载体和应用。
背景技术
小麦赤霉病(FHB)是一种真菌性病害,它能对小麦,大麦等禾谷类以及玉米等作物产生病害而直接造成作物减产和品质下降;另一方面,收获的粮食由于被deoxynivalenol(DON)和其他一些单端孢霉烯类毒素所污染,人和动物误食会产生毒害。目前随着全球气候的变暖,该病在全世界各个小麦种植区迅速蔓延,控制小麦赤霉病的发生发展已经成为世界性的难题。
选育抗赤霉病小麦品种是控制赤霉病最经济和有效的途径。明确其抗病机制,克隆抗病相关基因,对于防治小麦病害、开展抗病育种改良具有重要理论指导意义。小麦抗病分子机制是目前小麦赤霉病研究的热点课题。赤霉病病原菌与寄主小麦之间的互作关系十分复杂。赤霉病菌具有腐生兼寄生的特性,既能在死体植物上生活,也能从活体寄生植物上汲取营养;小麦对赤霉病抗性是非小种专化的,同时也是多基因控制的数量遗传性状。分析病原菌-寄主互作过程中的基因表达情况,有助于发掘抗病基因和发现抗病通路,对于阐明抗病机制具有重要意义。利用各种途径和方法,如构建受赤霉病菌诱导表达的cDNA文库、SSH文库,利用双向电泳结合质谱技术、芯片技术等,筛选一些可能与赤霉病抗性相关的基因或蛋白,如各种病程相关蛋白、细胞色素P450、葡萄糖基转移酶、ABC转运蛋白等,也发现与抗病相关的信号通路,如茉莉酸途径、乙烯途径等。
小麦地方品种望水白是到目前为止普遍公认的对赤霉病抗性强,抗性稳定。本研究根据芯片检测望水白和感病突变体NAUH117穗部受赤霉菌诱导后基因表达谱差异,在望水白克隆出一个受体蛋白激酶基因,并将其转化感赤霉病病小麦品种扬麦158中,以期提高赤霉病抗性。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的上述缺陷,提供一种受体蛋白激酶基因TaRLK-B。
本发明的另一目的是提供该基因的表达载体。
本发明的又一目的是提供该基因和表达载体的应用。
本发明的目的可通过如下技术方案实现:
受体蛋白激酶基因TaRLK-B,来自普通小麦(Triticum asetivum L.)地方品种望水白,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。
该受体蛋白激酶基因编码的蛋白质TaRLK-B,其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。
含有所述的受体蛋白激酶基因TaRLK-B的表达载体。
所述的含有权利要求1所述的受体蛋白激酶基因TaRLK-B的表达载体优选以pAHC25为出发载体,将权利要求1所述的TaRLK-B基因插入pAHC25的Sma I和Sac I酶切位点间所得。
所述的受体蛋白激酶基因TaRLK-B在构建抗赤霉病小麦品种中的应用。
所述的含受体蛋白激酶基因TaRLK-B的表达载体在构建抗赤霉病小麦品种中的应用。
有益效果:
本发明首次从小麦种克隆得到了一个受体蛋白激酶基因TaRLK-B及其所编码的蛋白质TaRLK-B,为小麦中首次报道。将其插入表达载体pAHC25,得到的该基因的过量表达载体导入感病小麦品种中,可以提高感赤霉病小麦品种对赤霉病的抗性。TaRLK-B用于基因工程育种,将其导入易感赤霉病小麦品种中,能够获得具备赤霉病抗性的小麦种质。
附图说明
图1利用中国春第三部分同源群缺体-四体和部分3B短臂缺失系材料对TaRLK-B基因进行染色体区段定位,将TaRLK-B定位到3BS的0.78-0.87区段1,Marker;2,望水白(Wangshuibai);3,H117;4,中国春(Chinese Spring);5,N3A/T3B;6,N3A/T3D;7,N3B/T3D;8,N3B/T3A;9、N3D/T3A;10、N3D/T3B;11,3BS-3;12,3BS-8;13,3BS-9;14,3BS-1;15,水对照。
图2TaRLK-B在望水白、NAUH117和Alondra’s受赤霉菌诱导后的穗组织中的半定量RT-PCR横坐标表示赤霉菌诱导0h、6h、24h、48h、96h的小麦穗组织样品
图3TaRLK-B超量表达载体的构建
A:植物表达载体pAHC25;B:pAHC25:TaRLK-B表达载体构建
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