[发明专利]除去交联透明质酸中交联剂1,2,7,8-二环氧辛烷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，特别指的是用高压蒸汽法去除交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)。 

背景技术

开发能应用与临床的皮肤填充剂，就必须对透明质酸进行一系列的化学修饰和处理过程。如果采用非交联的透明质酸作为皮肤填充剂，那么，在皮肤中天然存在的透明质酸酶与自由基就会一个一个的切断聚合起来的透明质酸分子，快速降解非交联的透明质酸。结果使得透明质酸在组织内的半衰期只有一天到两天，然后经过水的稀释，在肝脏内逐步降解为水和二氧化碳。这样，产品在注射的部位就会很快的失去效用(在一周内)，结果使得非交联的透明质酸在皮肤中的滞留时间受到了很大的限制。因此，非交联的透明质酸起不到一个作为皮肤填充剂应该起到的疗效。 

所以，采用1，2，7，8-二环氧辛烷作为透明质酸的交联剂，将透明质酸的羟基和羧基都交联起来，提高了透明质酸分子的稳定性，有效地防止了透明质酸酶和自由基对透明质酸的降解作用，明显地提高了透明质酸在皮肤内的停留时间，具有量好的作为皮肤填充剂应有的疗效。但是，依据化学材料安全评估报告(Material Safety Data Sheets，简称MSDS)，1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)对皮肤具有刺激性甚至毒性。在透明质酸交联反应完全结束后，此交联剂必须被清除，以免残留的交联剂对皮肤造成不良的影响。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，采用高压蒸汽空法去除交联透明质酸中1，2，7，8-二环氧辛烷，去除大部分残留于交联透明质酸中的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)，而达到安全的含量范围内。可以确保交联透明质酸产品的安全性。 

本发明提供的一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法包括如下步骤： 

1)将交联透明质酸水凝胶用酸调整pH值至7-8，放置滚床上滚动18-24h，至达到透明质酸吸水平衡。 

2)用透气非透菌纸封住瓶口，置于高压灭菌锅中，加热至沸腾后，关掉高压灭菌锅 上的放气阀门。 

3)当气压升至0.12MPa，温度升至105℃时，打开放气阀放气，至压力降至0.1MPa，温度降至100℃时关掉放气阀门。 

4)重复步骤3)，让温度压力上升至之前的读数，如此反复4-5次，即可达到去除交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的目的。 

所述的水凝胶浓度为15-35mg/mL。 

步骤3)至步骤4)的高压时间为25-35min，优选30min。 

本发明中使用的交联透明质酸，其交联剂选用的是1，2，7，8-二环氧辛烷，其中交联剂加入量与透明质酸的质量比为0.01-1，实验中可选择交联剂与透明质酸的质量比为1∶1。 

本发明是采用高温下通过水蒸气将交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷汽化至上层蒸汽中，汽化后的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)蒸汽进入到外层的水蒸气中，并随着灭菌高压锅的放气口随水蒸气放出。当达到一定压强(0.12MPa)与一定温度(105℃)时，放去高压锅中的高压蒸汽，反复4-5次来回放气的过程，可通过气相色谱测得交联透明质酸中的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)的残留量。 

本发明提供了一种除去交联透明质酸中交联剂1，2，7，8-二环氧辛烷的方法，采用高压蒸汽空法去除交联透明质酸中1，2，7，8-二环氧辛烷，去除大部分残留于交联透明质酸中的1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)，达到安全的含量范围内，可以确保交联透明质酸产品的安全性。本发明方法简单，容易操作，成本低廉，安全可靠。 

附图说明

图1为1，2，7，8-二环氧辛烷(DEO)标准样的顶空法气相色谱图。 

图2为经本发明高压蒸汽后交联透明质酸的顶空法气相色谱图。 

具体实施方式

实施例1： 

1、交联剂透明质酸水凝胶的制备