[发明专利]黑鲷抗菌肽表达载体与构建方法及表达产物与制备方法

权利要求书

1.黑鲷抗菌肽AS-hepc2的基因序列为：

ggctcattca ctgaggtgca agagccggag gagccaatga acaatgagag tccagttgct     60

gcacatgaag agaagtcaga ggagtcctgg aagatgccgt ataacaacag acacaagcgc    120

agccccgctg gttgtcgctt ttgctgcggt tgctgtccta acatgagagg atgtggtgtc    180

tgctgcaggttc                                                         192。

2.黑鲷抗菌肽AS-hepc2的氨基酸序列为：

Gly Ser Phe Thr Glu Val Gln Glu Pro Glu Glu Pro Met Asn Asn Glu

1                 5                      10                      15

Ser Pro Val Ala Ala His Glu Glu Lys Ser Glu Glu Ser Trp Lys Met

              20                      25                     30

Pro Tyr Asn Asn Arg His Lys Arg Ser Pro Ala Gly Cys Arg Phe Cys

         35                     40                     45

Cys Gly Cys Cys Pro Asn Met Arg Gly Cys Gly Val Cys Cys Arg Phe

    50                     55                    60。

3.黑鲷抗菌肽AS-hepc2的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)构建黑鲷抗菌肽AS-hepc2的重组表达载体；

2)将步骤1)所得重组表达载体导入宿主细胞，并将宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；

3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即黑鲷抗菌肽AS-hepc2前体肽蛋白。

4.如权利要求3所述的黑鲷抗菌肽AS-hepc2的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述表达载体选用pET28a+。

5.如权利要求3所述的黑鲷抗菌肽AS-hepc2的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述宿主细胞为大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLys。

6.如权利要求3所述的黑鲷抗菌肽AS-hepc2的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述分离纯化的具体方法为：将诱导表达后菌体进行超声破碎，离心收集超声破碎后上清液，进行亲和层析纯化。